Содержание

Заблокировали (заморозили) страницу ВКонтакте. Что делать? Решение

Очень многие пользователи сталкивались с ситуацией, что однажды их страничка в социальной сети “Вконтакте” оказывалась заблокированной из-за того, что ранее была взломана злоумышленниками, и с неё производилось распространение спама. В нашей заметке подробно, наглядным способом в картинках, расскажем Вам, что необходимо сделать для того, чтобы вновь восстановить доступ к своей страничке в социальной сети “Вконтакте”.

Начнём всё с самого начала – опишем суть возникшей проблемы. Допустим, Вы, как обычно вводите свои логин и пароль от сайта “Вконтакте” и, неожиданно для себя, попадаете на страничку со следующим сообщением:
“Ваша страничка была взломана, и с неё рассылается спам. Для того, чтобы это прекратить, Вам необходимо срочно поменять пароль от странички”.

Как же можно зайти на заблокированную администратором страничку “Вконтакте”?

Для начала Вам необходимо будет записать свой старый пароль в первом свободном поле, а во втором и третьем окошках записать свой новый пароль, который Вам необходимо будет придумать самостоятельно. Постарайтесь так, чтобы на этот раз Ваш персональный пароль оказался более надежным и Вашу страничку в социальной сети вновь не взломали.

Дальше Вам предложат записать номер Вашего мобильного телефона, который Вы раньше привязывали к профилю сайта “Вконтакте”. На этот номер Вы получите SMS-сообщение с кодом, который Вам необходимо ввести в следующем окошке и Ваша страничка в социальной сети будет разблокирована.

Как быть если злоумышленникам удалось сменить привязанный к аккаунту социальной сети номер мобильного телефона или же Вы его забыли, или просто поломалась SIM-карточка?

Не стоит отчаиваться, даже и в этом случае, возможно, разблокировать страничку “ВКонтакте”, однако придётся здорово повозиться над этим.

Для разблокирования профилянеобходимо будет отправить администраторам социальной сети “Вконтакте” заявку и тогда на заблокированной страничке они вручную поменяют пароль.

Необходимо нажать на ссылочку “отправить заявку на восстановление доступа” к заблокированной страничке соцсети. После этого перед Вами откроется окошко для восстановления доступа к страничке.

Здесь, пожалуй, необходимо остановиться и наиболее подробно рассмотреть, как заполнять форму, потому что большинство пользователей неправильно заполняют эту форму, и администрации сайта приходиться отказывать в восстановлении доступа к аккаунту.

Как же правильно заполнять форму для восстановления доступа к страничке в социальной сети “Вконтакте”:

2. Нынешний E-mail или логин странички.

Здесь всё предельно просто – Вам надо ввести в это поле логин от “Вконтакте”, который вводился Вами каждый день для входа.

3. Доступный для Вас E-mail.

Не случайно администраторами социальной сети подчеркивается слово “доступный для Вас E-mail”, ведь, взламывая Вашу страничку, злоумышленники также могли взломать и Вашу почту, поэтому убедительно рекомендуем Вам завести новый почтовый адрес. Но если же Вы всё-таки уверены в том, что Ваша почта не была взломана, тогда вводите свой старый почтовый адрес.

4. Ваш комментарий на сайте:

Постарайтесь наиболее слёзно описать создавшуюся ситуацию. К примеру: “Здравствуйте! Помогите мне, пожалуйста, восстановить доступ к моей заблокированной страничке на сайте “Вконтакте”! Мой аккаунт взломали злоумышленники и рассылали с неё спам, а затем заблокировали его! Help me, plase!”

5. Номер Вашего мобильного телефона.

Здесь вписываем номер Вашего мобильного телефона. Ведь именно на номер этого телефона и придёт SMS-сообщение с кодом от сайта “Вконтакте”.

6. Прежний номер Вашего мобильного телефона.

Это поле заполняйте только в том случае если раньше страничка в социальной сети “Вконтакте” привязывалась к другому номеру мобильного телефона. Если за Вас это проделали злоумышленники, тогда данное поле оставьте пустым, однако на это обязательно укажите в четвёртом пункте.

7. Страна.

Из представленного списка стран выбирайте ту страну, в которой Вы находились на момент регистрации в социальной сети. К примеру: “Россия”.

Также желательным будет указывать год и месяц Вашей регистрации. Допустим, Вы не помните месяц, в котором зарегистрировались в социальной сети, тогда это поле оставляйте не заполненным.

Теперь Вам необходимо будет сделать две фотографии. На одном фото должен быть заснят любой документ, который бы удостоверял Вашу личность. При фотографировании сделайте так, чтобы в кадр чётко попадали Ваши имя и фамилия, Ваша фотография и печать. Если даже Вы сфотографируете свой паспорт, но не захватите печать, тогда Вам будет отказано в восстановлении доступа.

На второй фотографии в кадр должны попадать Вы на фоне монитора, на котором, хотя бы смутно, но должно быть видно, что у Вас открыта страничка с заполняемой анкетой для восстановления доступа к заблокированному аккаунту.

Когда обе фотографии успешно будут загружены, Вы сможете видеть их уменьшенное изображение. Далее нажимаете на кнопку “Отправить заявку”.

Появляется окошко, в котором Вам необходимо будет вписать код, который “Вконтакте” раньше присылал на указанный Вами номер телефона.

Допустим, Вы получили код – 28Z2ss7y.

Если Вы всё проделали правильно, тогда через мгновение Вы окажитесь на страничке с одной единственной ссылкой, которую рекомендуем обязательно сохранять.

Затем необходимо зайти в свою электронную почту и открыть письмо от сайта “Вконтакте”:

“Здравствуйте, уважаемый пользователь.

Заявка на восстановление доступа к Вашей страничке на сайте vk.com прошла успешную проверку и была одобрена.

Чтобы войти на свою страничку воспользуйтесь этим E-Mail или Логином: [email protected]
Ваш новый пароль: 51953980
Теперь Ваша страничка будет привязана к номеру Вашего мобильного телефона: +79123456789
При желании Вы сможете поменять пароль в “Настройках” на Вашей страничке.

Желаем огромной удачи!
С большим уважением к Вам,
Администрация сайта vk.com”

Теперь необходимо будет вернуться на страничку социальной сети и указать Ваш новый пароль и логин, и всё! Заблокированная страничка “Вконтакта” опять доступна!

Не забудьте в обязательном порядке поменять пароль на более сложный, в противном случае аккаунт опять могут заблокировать за распространение спама.

Мы настолько привыкли к общению с друзьями на сайте в контакте, к просмотру обновлений пользователей в новостях, прослушиванию любимых треков на своей страничке, да и вообще ко всему, что там происходит! Ощущается настоящая зависимость от социальной сети, когда мы вдруг видим, что страничку вконтакте заблокировали — что делать?

Заблокирована страница вконтакте на работе — что делать

Ничего удивительного нет в том, что работодатели или руководство учебного учреждения могут запретить доступ в контакт. Чтобы повысить эффективность труда сотрудников, они блокируют доступ с рабочего места в социальные сети. Но и тут человеческий ум нашел обходной путь.

Для того чтобы разблокировать страницу вконтакте с рабочего места, воспользуемся анонимными прокси-сайтами. Их еще называют анонимайзер. Для этого в поисковике введите «анонимайзер» и зайдите на любой из предложенных. После этого следует ввести адрес сайта (vkontakte.ru) и авторизироваться, то есть ввести свой email и пароль, как обычно. Дело в том, что вместо настоящего адреса сайта вконтакте будет виден совершенно другой. Все возможности контакта сохраняются, Вы пользуетесь социальной сетью как и раньше. Системные администраторы могут рано или поздно найти этот сайт и закрыть доступ к нему. Не переживайте, в сети постоянно обновляются анонимные прокси-серверы, и Вы сможете пользоваться разными анонимайзерами практически бесконечно!

Заблокирован аккаунт вконтакте, просят послать смс…

Вероятнее всего, Ваш компьютер атакован вирусом. Никаких смс посылать не нужно. И деньги пропадут, и аккаунт не разблокируется. Четко следуем инструкции:

  1. Диск C, папка windows, system32, drivers, etc.
  2. Там мы видим файл hosts, который открываем с помощью блокнота.
  3. В блокноте находим строки с текстом «durov.ru, vkontakte.ru». Удаляем их.
  4. Сохраняем изменения в файле.
  5. Иногда требуется проделать это в безопасном режиме компьютера, так как файл hosts не открывается. Для этого перезагружаете компьютер и во время этого жмете кнопку F8 на клавиатуре. Когда предлагают выбрать режим, нажимаете на «безопасный». И уже в этом режиме делаете все это, начиная с пункта 1.

Как разблокировать взломанную страницу вконтакте

Конечно, обидно, если твою страницу в контакте взломали и спамят оттуда или вообще меняют информацию о тебе, ставят ужасную фотографию. Пароль они естественно сразу же поменяли, чтобы ты не смог зайти и все уладить.

Разблокировать взломанную страницу не сложно. Многие считают, что это занимает много времени и ленятся. Ничего подобного! Обратиться в техподдержку довольно просто, сочинять ничего не придется. Найдем анкету для заполнения. На сайте вконтакте внизу любой страницы заходите в техподдержку и читаете новости. Там в четвертом пункте пользователям будет предложено воспользоваться помощником. Необходимо нажать на «страница недоступна, на нее не войти», затем на «почтовый ящик не доступен, на него не войти». И наконец Вы находите форму для заполнения. Заполняете ее, как Вас просят и отправляете 2 фотографии. Чтобы разблокировать взломанную страницу вконтакте, обязательно нужно отправить фотографию документа с печатью, удостоверяющего личность, и еще одну с собой на фоне сообщения из контакта.

Недавно страницы в контакте стали привязывать к номерам мобильных телефонов. Поэтому сейчас не составляет проблем восстановить доступ с помощью своего телефонного номера.

Также многие пишут, что есть способ разблокировать страницу в контакте, послав сообщение с просьбой администраторам сайта на email Но говорят, что ожидать придется слишком долго, поэтому лучше пользоваться методами, предложенным выше. Вернуть и разблокировать свою любимую страничку вконтакте можно, поэтому переживать не стоит.

Для многих, кто в ВКонтакте не только общается, но и работает, блокировка личной страницы — настоящая трагедия. Я поделюсь своим личным опытом, так как уже не один раз была в подобной ситуации, и категорически не хочу повторения такой ситуации.

Итак, что делать если вашу страницу в Контакте заблокировали? Вдохните глубоко и успокойтесь. Вы ничего не можете изменить. Вы не сможете разблокировать страницу в Контакте, а если будете предпринимать какие-либо незаконные действия, за которые «добрые люди» еще и попросят заплатить, то у вас есть большой шанс лишиться вашей страницы навсегда, или, как любит говорить ВКонтакте — навечно)))

Безусловно, вы можете написать в техподдержку и попросить разблокировать страницу.

Вы даже можете написать вполне реальным и милым до безобразия людям в Команду технической поддержки . Хотите посмотреть, как они отвечают на все просьбы?

После таких ответов я решила больше не тратить свою энергию впустую, а занялась поиском информации о том, что лучше сделать до того, как страницу в Контакте заблокируют. Не секрет, что риск быть заблокированным есть всегда. И блокировка не всегда связана с нарушением нами правил в Контакте. Сейчас любой пользователь может отправить вас в бан просто за то, что вы ему не понравились. А раз есть такая техническая возможность, то сама блокировка происходит мгновенно и без всякого предупреждения.

А вы читали хоть раз Правила пользования Сайтом ВКонтакте?

Я бы еще хотела пару слов сказать о Правилах в ВКонтакте. Нелишним будет для собственной безопасности, их внимательно изучить и осознать, что, по большому счету, в этой соцсети спокойно можно только общаться, все остальные наши действия по добавлению друзей, лайкам и репостам подвергают нас огромному риску в любой момент. Предполагаю, что мой бан связан с добавлением кого-то в друзья. И вот этот кто-то
решил, что я ему не нравлюсь, и спокойненько меня забанил.

Что я сделаю в первую очередь, когда меня разблокируют?
  • Первое, что я сделаю, — создам еще одну личную страницу, отдельную, от имени которой буду лайкать, репостить, добавлять в друзья.
  • Добавлю новую страницу во все свои группы, которые я администрирую, для того, чтобы подстраховаться на всякий случай и не пользоваться страницей родственников во время «несчастных случаев».
  • Благодаря новому аккаунту я буду спокойна, что в моих группах никогда не появится забаненный профиль администратора, который, как вы понимаете, не лучшим образом влияет на имидж группы.

На мой взгляд, создание дополнительного аккаунта — лучшее решение, для того, чтобы избежать проблем, работая в Контакте, и выполняя необходимые действия по раскрутке и продвижению своих групп. Безусловно, необходимо придерживаться требований, предъявляемых администрацией сайта к пользователям, но ведь бывает и так, что причина блокировки остается неизвестной, даже если ты думаешь, что правила не нарушены.

Ваша страница ВКонтакте разморозится только после окончания срока блокировки

Замечу, я мое отношение к таким мерам — отрицательное, так для всех пользователей наказание одинаковое, а степень тяжести «преступления» различается сроками блокировки. Думаю, что такое отношение больше похоже на судилище без суда и следствия:

  • нет обратной связи
  • невозможно разобраться в причинах
  • привести свои аргументы
  • отстоять свою позицию

Если наказывают за подозрительную активность, то именно сам ВКонтакте никогда не разрешит тебе пригласить больше положенного количества друзей. Значит количество не превышено, и причина в чем-то другом. Но есть ли смысл сейчас во всем этом разбираться? Ясно одно, что ВКонтакте глазом не моргнет и заморозит тебя, если что-то ему или другому пользователю не понравится.

Охраняйте свое душевное здоровье!

Поэтому, я еще раз призываю всех, кого постигла такая неприятность, не искать способы, с помощью которых, как вам кажется, можно разморозить свою страницу. Прочитайте мою статью еще раз, дождитесь окончания блокировки, обязательно создайте новый профиль, наполните его контентом и информацией, и от его имени выполняйте все действия, за которые, теоретически и практически, могут блокировать.

Главное, сохраните хорошее настроение и позитивный настрой, и не разрешайте внешним обстоятельствам на вас влиять негативно. Это не самое страшное, что может произойти. Если вы прислушаетесь к моему совету, то сможете себя оградить от подобных неприятностей. Желаю всем больших успехов!

Доступ к социальным сетям часто блокируют, на рабочем месте системные администраторы, а также, к примеру, когда в контакте пишет страница заблокирована
, это может быть из-за действий вируса. Этот вирус Вконтакте почти всегда просит ввести номер телефона, или же произвести оплату по QIVI кошельку на определенный номер телефона, который при звонке на него всегда выключен.

Если вы ввели свой номер телефона, то в скором времени на ваш телефон придет смс с кодом подтверждения. Ни в коем случае нельзя вводить код, если вы его введете, то вы автоматически оформите подписку на платные ресурсы, а также с вашего мобильного каждый день будут списываться денежные средства. В случае с оплатой на QIVI кошелек тоже нечего не произойдет — проблема, заблокирован контакт просит смс
, не решится. Ее можно решить не сколькими способами.

Как разблокировать контакт на компьютере

Как разблокировать в контакте бесплатно с помощью файла host

Самое простое решение, когда заблокировали контакт и одноклассники
– это редактирование системного файла host. Именно в него при заражении компьютера, так же как и при вирусе одноклассники , прописываются определенные значения, после чего компьютер просто-напросто не может получить доступ к сайтам. Помимо вируса данным файлом любят пользоваться системные администраторы, которые блокируют доступ обычному пользователю к определенным сайтам.

Для редактирования файла host необходимо зайти на локальный диск, где установлена операционная система, и перейти в папку . После чего находим и заходим в папку , в ней открываем и ищем последнюю папку под названием , а в ней- то и находится нужный нам файл host, открываем его с помощью блокнота и удаляем ненужные значения. Там сначала пишется IP адрес, а затем социальная сеть, к которой администратор заблокировал. Контакт у нас, значит, будет выглядеть так: 127.0.0.1 vk.com. Все подобные значения необходимо удалить, и уже после перезагрузки системы у вас получится разблокировать контакт бесплатно, также желательно изменить пароль на вашу учетную запись, так как она может в дальнейшем использоваться для рассылки спама. Если таким образом разблокировать контакт и одноклассники не получилось, то переходим к следующему пункту.

Как разблокировать на компьютере контакт антивирусными утилитами

Для того чтобы разблокировать контакт без смс необходимо скачать с официального сайта антивирусных программ утилиту для лечения компьютера от вирусов , так как если пишет, что контакт заблокирован, то может понадобиться большое количество времени. О том какую антивирусную утилиту выбрать, вы можете почитать

После того как вы скачали утилиту, необходимо перезагрузить компьютер и перед самым запуском Windows нажать клавишу , и загрузится в безопасном режиме. Как система загрузится необходимо запустить утилиту, и просканировать ваш компьютер на наличие вирусов. После того как найденные вирусы удалятся, необходимо перезагрузить компьютер в обычный режим и попробовать зайти в социальные сети, тем самым получится открыть заблокированный сайт в контакте
если, конечно, данная социальная сеть не заблокирована вашим сисадмином. Здесь также не забывайте про смену пароля.

Как разблокировать контакт на работе, когда админ заблокировал его

Рассмотрим обход запрета доступа администратором. Для того чтобы зайти в заблокированный контакт сисадмином, можно воспользоваться различными бесплатными анонимазейрами, зайдя через которые можно получить доступ к любому заблокированному сайту. Но будьте крайне осторожны и для начала использования анонимайзера Вконтакте почитайте сначала о том или ином сервисе отзывы, так как они могут создаваться хакерами, для воровства ваших паролей от учетных записей.

Вот прошло уже несколько недель, как в Украине были заблокированы такие социальные сети как: в «ВКонтакте» и «Однокласники». Кроме этого блокировка, так же, зацепила все сервисы, входящие в Mail Group и почти всё, что было связанно с «Яндексом» оставив только их поисковик и главную страницу.

В результате, чего и следовало ожидать, большинство пользователей оказались недовольны и возмущены подобной блокировкой. Как только появилась новость о том, что будет заблокированы «контакт» и «одноклассники», большинство восприняли её довольно таки спокойно. Так как думали, что блокировка будет происходить постепенно на протяжение нескольких лет.

Но, не успели все опомниться, как буквально через неделю все провайдеры, один за другим, начали закрывать доступ к данным социальным сетям, что для многих оказалось неожиданностью. Вследствие чего онлайн «ВКонтакте» среди украинских пользователей упал в разы, так как при попытке загрузки страницы vk.com, появлялось сообщение о том, что этот сайт временно не доступен.

Но не беда, к счастью на сегодняшний день существует довольно много различных инструментов, позволяющих разблокировать «ВКонтакте»
и «Одноклассники»
. Поэтому, давайте я вам покажу несколько примеров того, как можно обойти и получить полноценный доступ к своим любимым социальным сетям.

Как разблокировать «ВКонтакте» и «Одноклассники» на компьютере

В общем, для того, что бы открыть доступ к одной из этих соц. сетей нужно просто установить в браузер любое VPN расширение. На сегодняшний день подобных приложений существует очень много, конечно же некоторые из них полностью бесплатны, другие же распространяются на платной основе или устанавливают лимитированную версию в виде ограничение скорости.

Данные VPN расширения в принципе существовали и раньше, просто пользовались ими не так уж часто, например, это происходило в таких случаях, когда нужно было попасть на сайт, на котором подключение с вашей страны было запрещено. В принципе наша ситуация чем-то похожа.

Примеры будут показаны на таких распространённых веб-обозревателях как: «Mozilla Firefox» и «Google Chrome».

Начнём с Firefox:

Так же по необходимости, в дальнейшем, вы сможете отключать или включать данное расширение, просто кликнув по нему и в появляющемся меню установить ползунок в положение «Off/On».

Если же в друг у вас начнутся появляться уведомления о том, что сервер к которому вы подключены перегружен, следует его просто поменять. Опять же, открыв меню ZenMate и кликнув по среднему значку (стране)
, выбираем любую другую страну и щелкаем по кнопке «Изменить
».

Установка VPN расширения в Google Chrome

В Chrome порядок установки похожий:

Как обойти блокировку «ВКонтакте» в Opera

Так же, можно обойтись и без загрузки расширений. Достаточно просто установить браузер Opera, где данное VPN приложение от компании SurfEasy, которая принадлежит непосредственно Opera, уже встроено, вам же останется только включить его в настройках браузера.

После чего закрываем окно настроек и без проблем переходим в «ВКонтакт» или «Одноклассники».

Вот таким вот нехитрым образом вы сможете спокойно разблокировать «ВКонтакте» и получить обратно полноценный доступ к данным социальным сетям.

Как разблокировать «ВКонтакте» на смартфоне

Что касается смартфонов, то тут ничего нового, суть та же, ставим VPN и без проблем пользуемся контактом.

По умолчанию в TurboVPN установлен выбор самого быстрого сервера, но по желанию вы можете изменить его, щелкнув по изображению планеты в правом углу и выбрав там понравившийся сервер.

В общем, вот так вы с легкостью сможете разблокировать доступ к «ВКонтакте», «Одноклассникам» или к прочим сервисам Яндекса или Mail.ru, всего лишь в несколько кликов. Если же вдруг у Вас возникнут вопросы или нужна будет помощью, приглашаю вас к форме комментариев, обязательно постараюсь вам помочь.

Рекомендуем также

что делать, если заморозили страницу «В Контакте»

Заблокировать человека ВКонтакте
означает сделать так, чтобы он:

  • Не мог писать тебе сообщения.
  • Не мог смотреть твою страницу.

Рассмотрим здесь и то, и другое.

Если же ты хочешь пожаловаться на человека, чтобы его вообще заблокировали, читай «Как пожаловаться ВКонтакте ».

Как сделать, чтобы человек не мог писать тебе сообщения

Как внести человека в черный список через его страницу

  1. Зайди на страницу
    этого пользователя и найди там ссылку «Заблокировать» (например, «Заблокировать Александра»). Возможно, придется немного промотать страницу вниз, чтобы найти ее. Обычно она находится в самом низу левой колонки, после списка друзей этого человека, всех его видеозаписей и т.п.
  • Нажми на ссылку «Заблокировать (имя человека)»
    — с этого момента этот человек не сможет писать тебе сообщения.
  • Слово «Заблокировать» сразу же изменится на «Разблокировать» — это и означает, что человек заблокирован. Второе нажатие снимает блокировку, как будто ничего и не было.
  • Разумеется, в остальном для этого пользователя ВКонтакте ничего не изменится. Он будет так же, как и раньше, пользоваться сайтом, общаться с людьми — короче говоря, все возможности у него останутся, но он не сможет:

    Пользуйся этой функцией осторожно и только в крайнем случае, когда тебя кто-то очень сильно достал, потому что иногда можно кого-нибудь заблокировать и забыть об этом. И можно случайно заблокировать друга — несомненно, он будет в недоумении.

    И еще учти, что заблокированный человек может создать новую страницу ВК, чтобы еще раз попытаться выйти с тобой на связь. Тогда придется заблокировать и эту страницу, а в особо тяжелых случаях — пожаловаться на человека в администрацию ВКонтакте.

    Можно посмотреть всех, кого ты когда-либо заблокировал. Нажми «Мои настройки» и затем выбери закладку «Черный список» — там будут все заблокированные тобой люди. Кстати, там же можно заблокировать кого-нибудь, не заходя на его страницу:

    Как внести человека в черный список по имени

    1. Нажми «Мои настройки»
      и выбери закладку «Черный список».
    2. Введи имя человека или ссылку на его страницу (там есть подсказка в том месте, куда это надо вводить).
    3. Нажми кнопку «Добавить в черный список».
    4. Если с таким именем есть только один человек, то он сразу заблокируется — появится надпись «Пользователь добавлен в чёрный список».
    5. Если таких людей несколько, то появится их список, а рядом с каждым человеком будет ссылка «Добавить в бан-лист».
      Нажми эту ссылку рядом с тем, кого нужно заблокировать.
    6. Для того, чтобы разблокировать человека, служит ссылка «Удалить из списка» рядом с каждым заблокированным пользователем на этой же закладке «Черный список».

    Как сделать, чтобы человек не мог смотреть твою страницу

    Это более мягкий вариант блокировки и более универсальный. Можно разрешить просматривать свою страницу, например, только друзьям,
    тогда посторонние люди не смогут ее смотреть. Кроме того, можно запретить писать сообщения всем, кроме друзей или определенного круга людей. Удобство здесь в том, что не нужно конкретно выбирать, кого ты хочешь заблокировать — нужно только определить, с кем ты хочешь общаться.

    Как сделать, чтобы смотреть страницу и писать сообщения могли только друзья

    1. Если нежелательный человек есть у тебя в друзьях, удали его оттуда:
      • Нажми «Мои друзья» и найди в списке этого человека.
      • Нажми «Убрать из друзей».
    2. Нажми «Мои настройки»
      и выбери закладку «Приватность».
    3. Найди заголовок «Моя страница». Чуть ниже, напротив «Кто видит основную информацию моей страницы»,
      выбери «Только друзья».
    4. Найди заголовок «Связь со мной». Ниже, напротив «Кто может писать мне личные сообщения»,
      выбери «Только друзья».
    5. Если хочешь, посмотри другие пункты на этой странице и тоже оставь там доступ только для друзей.
    6. Все! Настройки сохранились.

    Подсказка

    На закладке «Приватность» можно выбирать вариант доступа не «Только друзья», а «Все, кроме. » и вручную указать человека, который не должен видеть страницу или писать тебе сообщения.

    Важно!

    Если у тебя закрыты личные сообщения от посторонних, не забывай об этом и не предлагай кому-либо написать тебе в личку — у них ничего не получится. Через личные сообщения происходит много общения ВКонтакте, так что следует подумать лишний раз, стоит ли лишать людей возможности написать тебе. Ведь может случиться так, что кому-то очень нужно будет с тобой связаться, а сделать этого он не сможет.

    На заметку:
    даже если ты закрыл личку от посторонних, люди, с которыми ты переписывался раньше, еще в течение недели
    смогут присылать тебе сообщения в уже начатый диалог.

    Как удалить из друзей человека (отписаться), который меня заблокировал?

    Действительно, если вы с этим человеком были друзьями в ВК, а потом он тебя заблокировал (ограничил доступ), то ты остаешься подписанным на него. Как удалиться из подписчиков и перестать видеть его новости?

    Ничего сложного нет:

    1. Зайди в «Мои друзья».
    2. Открой «Исходящие заявки».
    3. Найди этого человека.
    4. Нажми кнопку «Отменить заявку и отписаться».

    Все, больше этот человек ничем тебе не напомнит о себе. Если все равно не можешь найти, где эта кнопка, открой свою страницу заявок по этой ссылке: Исходящие заявки.

    Также отказаться от подписки на человека можно через свою страницу ВКонтакте, нажав там на «Интересные страницы» и далее «Отписаться» рядом с тем человеком, который тебе больше не нужен.

    Как убрать человека из подписчиков?

    Если ты не хочешь видеть какого-нибудь человека среди своих подписчиков, добавь его в черный список: открой свою страницу ВК и прямо под аватаркой нажми «Мои подписчики».
    Затем наведи мышкой на этого человека и нажми на крестик, который появится в правом верхнем углу.

    Из черного списка его можно удалить через 15 минут — в список подписчиков он не вернется (чтобы открыть черный список, нажми в меню «Мои настройки» и выбери закладку «Черный список»).

    В целом, насчет подписчиков волноваться не стоит: никаких прав у них нет, и на твоей странице они видят то же самое, что и любой другой посторонний пользователь ВК. Того, что у тебя выложено «только для друзей», подписчики не видят.

    Как запретить добавлять себя в друзья?

    Может потребоваться сделать так, чтобы человек не мог добавить тебя в друзья. Подавая заявку в друзья, он одновременно пишет сообщение — как это запретить?

    Сейчас ВКонтакте нет настройки «Кто может добавлять меня в друзья», ее убрали. Но есть способ сделать так, чтобы не приходили заявки в друзья от посторонних людей (тех, кто не является друзьями твоих друзей):

    1. Нажми «Мои настройки»
      и выбери закладку «Приватность».
    2. Под заголовком «Связь со мной» найди пункт «О каких заявках в друзья приходят оповещения».
    3. Поставь там вариант «От друзей друзей».

    Как пожаловаться на человека ВКонтакте, чтобы его страницу заблокировали?

    Об этом рассказано в нашей статье «Как пожаловаться ВКонтакте »

    Когда ВКонтакте заблокирован — это что-то другое?

    Да, когда человек вообще не может зайти в Контакт и ему выдается сообщение, что доступ запрещен, это означает, что либо у него на компьютере поселилась вредоносная программа, либо он на работе и ему просто закрыли доступ. Если выдается сообщение, что заблокирована страница в ВК, смотри эту инструкцию: Заблокировали ВКонтакте. Что делать? Решение. а если ты не можешь войти в Контакт по какой-то другой причине, читай тут: Не заходит в Контакт? Решение.

    Как заморозить страницу вк друга видео

    Посмотрите на эти интересные рецепты.

    Если вы активный пользователь в ВКонтакте, то наверняка хотя бы раз столкнулись с «заморозкой страницы в ВК». Заморозка – полная блокировка
    активности вашего аккаунта в социальной сети на какой-то срок. И если для обычного пользователя это не так страшно, то для тех, кто завязан страничкой в ВК с другими сайтами, делает бизнес, работает – это серьезная проблема.

    Обычно блокировка пользователя происходит по двум основным причинам
    . Прежде всего заморозка – это санкция, за нарушение правил в ВК. Реже – следствие взлома злоумышленниками вашей страницы, в таком случае лучше поменять пароль, скорее всего старый был слишком прост. Придумайте новый с более высоким уровнем сложности.

    И другой случай, когда уже мы являемся инициаторами блокировки нашей же страницы, или можем заблокировать чужой аккаунт
    .

    На первый взгляд может показаться, что между заморозкой по своей инициативе и удалением страницы нет принципиальной разницы. Однако во втором случае (удаление через опцию в настройках), вы в течении 7 месяцев можете в любой момент ее восстановить
    , а при заморозке по своей инициативе предусмотрен срок блокировки и с каждым разом он все больше, а то можно отправиться в бан навсегда.

    За что могут заблокировать страницу

    1. За несвойственную обычному пользователю активность
      : спам
      в группах, ежедневные подписки
      в большом количестве на группы и сообщества, отправление разного рода рекламных сообщений
      незнакомым людям, бесчисленное добавление в друзья, лайки
      и репосты
      записей, отправление сообщений одного и того же содержания сразу нескольким пользователям, публикация сомнительной информации.
    2. При поражении вирусами
      . Симптом будет тот же, что и в п. 1, только причина такого поведения вашей странички будет не в вас, а в вирусе, который начнет спамить от вашего имени, но не в ваших интересах.
    3. Из-за жалоб других пользователей
      Вконтакте. Любой человек имеет возможность пожаловаться на вас и любые ваши действия в службу технической поддержки. И если жалобу посчитают обоснованной, то ваша страница замораживается.
    4. Есть еще один момент. Если в сообщение пользователя будет встречаться слово VkBot и его производные, то страницу замораживают в течении нескольких секунд. Поэтому будьте внимательны.

    Как избежать блокировки в ВК

    Во-первых, соблюдать
    культуру общения в социальной сети. Во-вторых, не спамить
    . Если занимаетесь рассылкой, то хотя бы в привате объясняйте людям кто вы и чего хотите. Изменяйте
    текст рассылки, не шлите одно и то же всем подряд. В-третьих, не подписывайтесь
    на сомнительные сообщества и не постите сомнительный материал. И, наконец, защитите свою страничку от взломщиков хорошим качественным паролем
    , а компьютер от вирусов, установив хороший антивирусник
    .

    Что делать, если страницу заморозили

    Замораживают страницу обычно на некоторое время, спустя которое вы можете при помощи телефона, к которому привязан аккаунт, разблокировать
    страницу. Вам на мобильный, на который был зарегистрирован
    аккаунт, придет смс-сообщение
    с необходимым для разблокировки кодом. После чего вы просто поменяете пароль. Разморозить страницу раньше установленного срока действия ограничения невозможно
    , поэтому не советуем пользоваться сторонними сайтами, которые предлагают такую услугу.

    Блокируем чужую страницу

    Жалобу на надоевшего вам пользователя возможно подать непосредственно с его страницы. Для этого нужно спуститься
    немного вниз по страничке, найти и активировать опцию «Пожаловаться на страницу»
    . Ваша жалоба поступит на рассмотрение
    службы поддержки, а пользователь будет помещен в черный список и больше не будет вам докучать.

    Можно отдельные сообщения помечать как спам
    . Сначала пользуясь галочкой с левой стороны диалогового окна выбираете нужное сообщение, можно щелкать просто по сообщению, оно также выделится. После этого наверху в строке меню, нажимаете кнопку «Это спам»
    .

    Как разморозить страницу в контакте? – Случается, что пользователи известной социальной Сети могут сталкиваться с такими проблемами, как заморозка своего профиля. Это происходит в то время, когда бот на сайте считает, что от того или иного пользователя сайта может исходить подозрительная активность. Например, кто-то решил спамить внутри портала с целью продаж тех или иных товаров, вследствие чего это всегда не поощряется. Все подобные действия ведут к бану, поэтому черные дельцы постоянно регистрируют новые профили и дальше работают над своим делом.

    Однако замороженная страница может посетить и рядового пользователя, которые ни слухом ни духом не знаком с тем, что такое спам и для чего он нужен. В целом, в таких ситуациях стоит разобраться в том, как разморозить страницу в контакте, поскольку дальше пользоваться социальной сетью для общения с друзьями или знакомыми будет невозможно. И по этой причине сегодня мы расскажем, что именно нужно делать для успешного размораживания своего профиля в течение нескольких минут. Все, что нужно будет сделать человеку, — это прочитать наши данные и выполнить предложенные шаги.

    Почему можно столкнуться с заморозкой страницы?

    1. Наличие подозрительной активности – очень частые написания текста, копипастинг
    2. Наличие большого количества жалоб
    3. Наличие большого количества заявлений негативного характера от пользователей

    Когда происходит подобная вещь, человеку необходимо немедленно разобраться в том, что именно послужило причиной его блокировки. Если кто-то из недоброжелателей решился на подобные вещи, это всегда можно поправить. Необходимо уяснить, куда писать, если страница заморожена? – Теперь об этом можно узнать из нашего сайта.

    ВАЖНО: Иногда замороженная страница может быть получена по той причине, что аккаунт так или иначе был взломан, вследствие чего пользователь получил возможность отсылать негативные вещи от вашего имени. В этом случае стоит немедленно обращаться в службу технической поддержки сайта.

    Помните, что разморозка страницы – это ПОДТВЕРЖДЕНИЕ прав на нее. И сделать это можно через несколько шагов. Об этом ниже.

    Для того, чтобы снять неприятную блокировку, абоненту необходимо всего лишь нажать на нужное поле для выдачи данных по СМС-сообщению. После того, как СМС будет подтверждено, работники сайта предлагают сменить пароль в обязательном порядке, чтобы злоумышленники не могли снова воспользоваться возможностями по работе с чужими аккаунтами.

    Заблокирован доступ к странице? – Снять его можно через:

    1. Посылку запроса на высылание СМС-сообщения
    2. Ввод данных, которые были присланы в уведомлении на сайте в нужном поле
    3. Измена пароля
    4. Продолжение работы с социальной сетью

    ВАЖНО: Помните о том, что работать с СМС можно целиком и полностью на бесплатной основе, поэтому можно не переживать, что деньги со счета будут сняты.

    Иногда на сайте может быть сообщение вида «Стоимость разморозки такая-то». Суть в том, чтобы не попасться на удочку мошенников, которые подобным образом зарабатывают достаточно большие деньги, обманывая других людей. Помните: все мероприятия по восстановлению страницы БЕСПЛАТНЫ.

    Не забывайте о том, что лучше всего пользоваться последними версиями антивирусных программ, которые будут надежно защищать вас от хакеров или прочих злоумышленников.

    Как снять заморозку без СМС?

    На сегодняшний день можно работать и без уведомлений, поскольку страница может быть не привязана к тому или иному номеру. Признаться, подобные вещи уже почти устарели, но на всякий случай лучше о них упомянуть.

    1. Если страничка популярной сети ВКонтакте не связана СМС-сообщением, стоит поработать с почтой или иными реквизитами. Для начала стоит зайти по адресу вида «vk.com/restore», после чего использовать данные для восстановления.
    2. В данном случае можно ввести или логин с сайта, или почту. Все, что могло быть полезно.
    3. Если и этого пользователь не помнит, стоит ввести начальные цифры логина. Сайт определит, какая страница может быть восстановлена, после чего предложит иные варианты работы.

    С недавнего времени страницы в социальной сети ВКонтакте могут быть восстановлены через предложение документов (сканы фоторафий или паспортов), чтобы работники портала могли быть точно уверены, что страничка принадлежит именно тому человеку, кто подает запрос на разморозку.

    Наверное, это правильно, поскольку в этом случае можно точно знать, что страница будет в руках у нужного человека, а не у посторонних лиц.

    Что делать тогда, когда ни один способ не работает?

    Может быть и такое, что ни один вариант, который был описан выше, не будет работать так, как это необходимо. В данном случае стоит обратиться к службе поддержки, которая будет рада помочь каждому пользователю сайта в индивидуальном порядке.

    Как обращаться к работникам ТП?

    1. Для начала стоит вежливо представиться и написать суть проблемы
    2. Быстро отвечать на уточняющие вопросы
    3. Быть готовым к предоставлению нужных документов или опознавательных данных (пароли, логины, адреса почт)
    4. Немедленно применять те моменты, которые предлагают работники сайта

    В этом случае можно иметь отличные шансы на восстановление страницы в очень короткие сроки по времени, поэтому использовать подобные вещи выгодно и рационально для самого себя. Все, что необходимо здесь помнить, — это использование данных по:

    1. Привязке к почте, логину
    2. Работа с технической поддержкой сайта

    Не стоит забывать, что разобраться, как разморозить страницу в контакте, не так уже и сложно, поскольку все, что необходимо будет для этого, — это не отдаляться от шагов, описанных выше.

    Помните, что восстановление страницы возможно, и она не заблокирована навсегда. На всякий случай посоветуем иметь на ПК или ноутбуке готовые отсканированные документы паспорта, чтобы в том или ином случае предоставить их работникам по требованию.

    Надеемся, что основные причины блокировки страниц мы описали. Теперь многие из пользователей смогут удобно для себя их обходить или решать вопросы, когда они возникают.

    В качестве заключения хочется отметить, что на сегодняшний день социальная сеть ВКонтакте обладает передовыми технологиями, которые помогают возвращать страницы законным пользователям в короткие сроки по времени. Основной инструмент подобного действия – СМС-сообщения, которые работают совершенно бесплатно.

    Помните, что восстановить страницу, заблокированную сайтом, можно через три варианта шагов. Все они рабочие по состоянию на 2014-2015 года.

    Если доступ к странице утрачен с лёгкой руки админов соцсети, при попытке входа вам предоставят соответствующее уведомление. На стартовой страничке появится значок в виде собаки и информация о сроке блокировки. Если нарушение несущественное, начинают с суток, после чего пользователь вправе снова совершать действия на странице. Это делается в надежде на то, что вы осознаете неправильность поступка и не будете впредь так делать.

    1. Ввести исходные данные в форме входа.
    2. Узнать, на какой срок и по какой причине заморожен аккаунт.
    3. Выждать указанный срок (раньше времени войти не получится).
    4. Вновь войти через стандартную форму (в процессе потребуется сменить пароль).
    5. Не повторять предыдущих ошибок.

    Как заморозить свою или чужую страницу в ВК

    Как заморозить страницу в ВК – с таким вопросом сталкиваются и обычные пользователи, поссорившиеся с другом/парнем (чаще такими вещами страдают девушки) и владельцы бизнес-аккаунтов, которым нужно на время устранить конкурента. Временно нейтрализовать можно и свой, и чужой аккаунты. Заморозить чужой профильвполне легально, разработаны специальные механизмы, позволяющие отправлять массовые жалобы на конкретного человека.

    Что такое заморозка

    Заморозка представляет собой временную или постоянную блокировку страницы пользователя, выполненную им самим или администрацией социальной сети.

    • Человек может самостоятельно заблокировать собственную страничку, удалить её (сразу окончательно и бесповоротно не получится – придётся подождать 7 месяцев, в течение которых профиль может быть восстановлен).
    • Забанить страницу пользователя имеет право только техподдержка ВК в связи с нарушениями внутренних правил сайта. Кстати, отправить жалобу на аккаунт могут все желающие: чем больше жалоб, тем выше вероятность блокировки.

    Как заморозить свою страницу в ВК на время

    Решили отдохнуть от «контакта» и теперь думаете, как заморозить свою страницу вк, чтобы не поддаваться соблазну. Самый простой способ – удалить её на время через меню Настроек профиля.

    На восстановление выделяется 7 месяцев. Процедура проста: входите через обычную форму со старым логином и паролем, подтверждаете намерения и попадаете в ленту.

    Как заморозить свою страницу в ВК навсегда

    Если хотите удалить собственный аккаунт навсегда, не размораживайте страницу в течение 7 месяцев, забудьте о её существовании (в крайнем случае, заведите новую). Хорошенько подумайте – по истечении указанного времениадминистрация ВКонтакте удалит профиль автоматически без возможности восстановления.

    За что могут заморозить страницу в ВК

    Бывает добровольная и принудительная заморозка профиля. Первая выполняется пользователем собственноручно, а вторую организовывают специалисты технической поддержки сайта. Просто так ВК никого не блокирует – только в случае нарушения правил пользования:

    • При обнаружении подозрительной активности: «синдром крокодила Гены», когда массово ищите друзей, шлёте одинаковые сообщения, ставите огромное количество лайков и репостите ересь вроде рекламы домашних отваров от подагры. Техподдержка блокирует профиль на срок до суток, чтобы вы поняли тяжесть совершённого проступка и не повторяли. Если активность не прекращается, срок блокировки увеличивается с каждым разом.
    • Взлом. Проторенными дорожками злоумышленники получают доступ к профилю, выполняя перечисленные выше действия, за которые по итогу забанят вас.
    • На профиль пожаловались. Любой зарегистрированный пользователь может отправить жалобу на чужой профиль, если, по его мнению, в нём содержится информация, нарушающая правила Вконтакте: спам, незаконные действия, неприличный контент и т.п. Если такого у вас не водится, не спешите радоваться, ведь существует искусственная накрутка жалоб через специальные сообщества.

    Как заморозить чужую страницу в ВК навсегда

    Заметили нарушения или просто надоел пользователь, но не знаете, как заморозить страницу ВКонтакте навсегда? Способа, решающего этот вопрос наверняка, нет, разве что речь о злостном нарушителе. В этом случае многочисленные жалобы быстро подействуют на админов ВК, как сигнал к вечному бану.

    Временно избавиться от надоевшего профиля помогают сообщества «единомышленников». Добавляетесь в группу, просите участников сделать пару кликов мышкой и помочь на бесплатной основе забанить некоего Петю Сидорова с указанием подходящей случаю причины. Отозвавшиеся переходят по ссылке и кликают, выбирая нужный пункт.

    Готово! Теперь вы знаете, как заморозить чужую страницу в вк, пусть и временно.

    Сейчас разберем очень важную тему. Речь пойдет о заморозке страниц вконтакте. Мы научимся проводить эту процедуру со своей персональной страничкой, так и с другими пользователями социальной сети.

    Поговорим про механизмы, с помощью которых выполняется эта процедура. И рассмотрим всевозможные нюансы. Давайте посмотрим, как можно заморозить страницу в вк.


    Что такое заморозка

    Тут можно выделить 2 момента:

    Ниже будет приведено подробное описание всех вариантов.

    Ручная заморозка своей страницы

    Во-первых, ознакомьтесь со следующими материалами:

    Там много полезной информации по данной теме.

    Что касается ручной блокировки — этот вариант пригодится нам в том случае, если мы ходим удалить нашу страницу. Сделать это можно навсегда, и на некоторое время. Суть процесса не изменится. Разве что в течении 7 месяцев, не забудьте восстановить ее (см. ).

    Давайте разберем на примере.

    Открываем свою страницу, и идем в раздел «Мои настройки»
    .

    Теперь наша страничка заморожена. Если она вам больше не нужна, просто забудьте о ней. Если понадобилась — не забудьте восстановить. Ссылка на инструкцию приведена выше.

    За что могут заморозить мою страницу?

    Давайте поговорим о причинах, по которым мы может получить блокировку.

    Выделим несколько основных категорий.

    1. Подозрительная активность
    . Если вы начнете массово рассылать заявки в друзья, ставить лайки и репостить записи (см. ), или писать одинаковые сообщения сразу нескольким пользователям, тогда вас автоматически заморозят.

    Не стоит заниматься такими вещами. Спам в социальной сети не приветствуется. Но особых проблем здесь нет. Вы сможете быстро разморозить страницу, с помощью СМС кода.

    2. Заражения вирусами
    . Если вы подцепите электронную заразу, и злоумышленники получат доступ к вашему аккаунту, то они начнут использовать его в своих целях. Как правило, они будут выполнять те же действия — спамить (см. ), массово добавлять в друзья и тд. И вашу страницу снова заморозят.

    Здесь желательно проделать следующие операции. Сменить пароль (см. ), найдите и удалите с компьютера все вирусы.

    3. Заморозка из-за жалоб пользователей
    . Любой пользователь может отправить жалобу на вас, на ваши записи, комментарии и тд (см. ). Жалобы рассматриваются администрацией, и если они считают их обоснованными, то ваша страница замораживается. Это палка о двух концах. С одной стороны вам нечего боятся, если вы не совершаете неправомерных действий. Но количество жалоб можно накрутить искусственно, и вы рискуете получить блокировку, даже в том случае, если ничего не совершали.

    Что здесь можно посоветовать. Не злоупотребляйте нарушением правил социальной сети. А если уже схлопотали жалобу, то попробуйте выйти на связь с техподдержкой, и объяснить им ситуацию.

    Процесс отправки жалобы будет рассмотрен ниже.

    Как отправить жалобу и заморозить чужую страницу в вк

    Самый простой путь — отправить жалобу прямо со страницы пользователя. Для этого прокрутите ее немного вниз, и найдите ссылку «Пожаловаться на страницу»
    .

    Ваша претензия поступит на рассмотрение в техническую поддержку. А сам пользователь попадет в ваш черный список (см. ).

    Можно вручную отметить спамные сообщение пользователя, если он отправляет их вам.

    Для этого перейдите к диалогу, выделите нужное сообщение, и в строке меню, нажмите кнопку «Это спам»
    .

    Чем больше обоснованных жалоб будет отправлено, чем больше вероятность того, что этого пользователя заморозят.

    Помните, в предыдущем пункте я говорил о том, что механизм можно накрутить? Сейчас я покажу вам как.

    Достаточно найти группу или сообщество, в котором люди помогают друг другу, в рамках социальной сети. И попросить их отправить жалобу на пользователя.

    Вот пример такой группы.

    Найди ее, или аналогичные, вы сможете через поиск.

    Теперь достаточно в комментариях оставить свою просьбу. Укажите id страницы пользователя (см. ), опишите суть его нарушений, и попросите участников группы, отправлять жалобу.

    Чем больше претензий будет направлено в службу поддержки, тем более высока вероятность заморозки страницы.

    Заключение

    Подводя итоги, можно заявить о том, что теперь вы полностью разбираетесь в процессе заморозки своей и чужих страниц вконтакте.

    Еще раз повторю — не стоит злоупотреблять этим механизмом, а уж тем более самим нарушать правила социальной сети. Данная функция была создана для того, чтобы «Очистить» контакт от нежелательных участников, и посторонней информации. Используйте ее с умом.

    Facebook

    Twitter

    Вконтакте

    Одноклассники

    Google+

    Убытки BlackRock из-за ситуации с российскими активами составили $17 млрд :: Новости :: РБК Инвестиции

    Стоимость российских активов под управлением компании вследствие их уценки снизилась с $18,2 млрд до $1 млрд

    Фото: Shuttestock

    BlackRock, одна из крупнейших инвестиционных компаний мира и крупнейшая в мире по размеру активов, на фоне ситуации с российскими активами понесла убытки в размере около $17 млрд. Об этом сообщает Financial Times.

    По данным компании, ее клиенты в конце января владели российскими бумагами на сумму более $18,2 млрд. Однако 28 февраля BlackRock объявила, что стоимость российских активов упала до $1 млрд, что эквивалентно менее 0,01% от всех активов под ее управлением. Изменения произошли из-за уценки, а не от продажи активов.

    BlackRock также снизила стоимость своего крупнейшего ориентированного на Россию биржевого фонда iShares MSCI Russia менее чем до $1 млн. В конце прошлого года его стоимость составляла примерно $600 млн. Компания приостановила выпуск бумаг фонда.

    28 февраля BlackRock решила приостановить закупку российских ценных бумаг в своих фондах. Компания настаивала тогда, чтобы поставщики индексов исключили эти ценные бумаги из широких базовых показателей. Вместе с тем в конце февраля инвестиционный гигант увеличил свою долю в российской золотодобывающей компании «Полиметалл» с 5,07% до 10,08%

    В связи с падением стоимости российских бумаг BlackRock также заморозила вывод средств из фондов, в портфеле которых эти активы занимают значительную часть. На этот шаг, помимо BlackRock, пошли еще 25 крупных компаний по управлению активами, среди которых JPMorgan Chase, BNP Paribas, UBS и другие. Общая сумма замороженных средств оценивалась в €4 млрд.

    Всего по состоянию на конец 2021 года иностранцам принадлежали российские активы почти на $170 млрд, из них $88 млрд приходилось на акции, $21 млрд — на корпоративные долговые обязательства. Иностранцы владели также долларовыми ОФЗ на сумму $20 млрд и рублевыми гособлигациями на сумму $41 млрд.

    «Если у вас остались российские активы, вы либо продадите их очень дешево — если сможете найти покупателя, либо же вам придется списать их стоимость до нуля», — прокомментировал сложившуюся ситуацию начальник отдела портфельной стратегии развивающихся рынков TD Securities Кристиан Маджио.

    «Защита от ослабления рубля». Пришло ли время покупать китайский юань?

    Узнайте о возможностях нашего Каталога в телеграм-канале «РБК Инвестиций»

    Автор

    Марина Ануфриева

    все лучшие модели Manconi

    Какие модели слайсеров лучше всего подходят для нарезки мяса прямо из морозильной камеры? И каковы их основные черты? Откройте его на этой странице, где мы познакомим вас с лучшими слайсерами для замороженного мяса. Все модели предоставлены компанией Manconi, которая специализируется на производстве высококачественных электрических и профессиональных мясорубок как для европейского, так и для мирового рынка, включая американский.

    На этой странице мы увидим: 

     

    Многие гастрономы, супермаркеты и продовольственные магазины часто сталкиваются с необходимостью разделки мяса в замороженном виде, так как неудобно каждый раз размораживать его. Тем не менее, замороженное мясо на сегодняшний день является одним из самых сложных продуктов для нарезки, поэтому довольно сложно найти машину, которая дает профессиональные результаты с этим типом продуктов. На самом деле, многие слайсеры теряют точность при нарезке замороженных продуктов, а лезвие легко испортить неправильным использованием.

    Чтобы решить все эти проблемы, Manconi создал ряд профессиональных слайсеров, специально предназначенных для нарезки замороженного мяса. На этой странице мы представляем подборку лучших машин, доступных для европейского, американского и мирового рынка, а также даем вам несколько советов о том, как нарезать замороженное мясо.

    350 VK TC Dual: самый простой процесс очистки

    350 VK TC Dual — вертикальный слайсер, идеально подходящий для нарезки замороженного мяса . Широкую тарелку и пресс для мяса можно снять для облегчения очистки .Этот слайсер способен нарезать очень тонкие ломтики с минимальными отходами и имеет диаметр 350 мм.

     

    370 VK TC Dual: компактные размеры для качественного реза

    370 VK TC Dual — это автоматическая слайсер для замороженного мяса диаметром 370 мм. Этот слайсер имеет очень компактные размеры , а его компоненты легко снимаются для облегчения процесса очистки.

     

     

    370 VK TC Dual Big: высокая грузоподъемность

    370 VK TC Dual Big — отличная слайсер для замороженного мяса диаметром 370 мм. Плита имеет очень важный размер и гарантирует высокую грузоподъемность. Поддерживающее устройство ломтиков предназначено для нарезки очень тонких ломтиков без отходов.

    Может ли мясорубка резать замороженное мясо?

    Обычно мясорубка не подходит для нарезки замороженного мяса, потому что она слишком твердая и может быть повреждена . Решение заключается в выборе определенного типа мясорубки с сильным захватом и мощным механизмом нарезки для получения однородных и точных результатов, как и в моделях Manconi , описанных выше.

    Как нарезать замороженное мясо

    Лучше всего резать замороженное мясо с помощью правильного инструмента . Автоматический слайсер для замороженного мяса позволяет нарезать идеальных ломтиков мяса , но важно проверить следующие элементы:

    • Слайсер должен иметь зубчатое лезвие , потому что оно идеально подходит для чистых и точных разрезов даже самых твердых продуктов ;
    • Пластина должна иметь превосходную гладкость , чтобы помочь оператору во время процесса резки и очистки ;
    • Слайсер должен быть безопасным и надежным , в соответствии с европейским регламентом . Нержавеющая сталь — лучший материал для этого типа продукции, поскольку она устойчива к ржавчине и коррозии.

     

    Вы нашли для себя подходящий слайсер?

    Свяжитесь с нами бесплатно

    , чтобы раскрыть всю линейку

     

    Слайсеры для замороженного мяса по индивидуальному заказу

    По запросу все слайсеры производства Manconi доступны с цветными ручками и пластиковыми компонентами в соответствии с потребностями клиента. Кроме того, каждый слайсер может быть окрашен влагостойким и устойчивым к коррозии глянцевым покрытием в любой цвет по выбору.Расписной слайсер — красивый элемент интерьера, который повышает привлекательность любого занятия. Какой твой любимый цвет?

     

    Общие характеристики слайсера для замороженного мяса Manconi

    Из-за сложности часто задают такие вопросы, как «Как нарезать замороженное мясо?» возникают. Ответ прост и кроется в видах профессиональных замороженных мясорубок и их особенностях. Вот некоторые:

    • Все профессиональные слайсеры Manconi сертифицированы в соответствии с самыми строгими нормами ЕС: они безопасны, надежны и изготовлены из безопасных материалов, таких как нержавеющая сталь, устойчивая к ржавчине и коррозии.
    • Слайсеры для замороженного мяса

    • Manconi также подходят для мирового рынка: хотя некоторые модели специально разработаны для рынка США, другие могут использоваться на любом другом рынке за пределами ЕС.
    • Они поставляются с зазубренным лезвием, которое необходимо, если вам нужно нарезать твердые продукты, такие как замороженное мясо, поскольку оно обеспечивает чистые и точные срезы.
    • Слайсеры для замороженных продуктов Manconi также оснащены многими съемными компонентами, такими как отдельная точилка, чтобы облегчить операции по очистке от жидкостей и жиров, выделяемых замороженным мясом при нарезке.
    • И последнее, но не менее важное: превосходная гладкость пластин снижает усилия оператора и упрощает процедуры очистки.

     

    Вам нужен совет, какую модель выбрать?

    Свяжитесь с нами

     

    Советы детского стоматолога по прорезыванию зубов

    Автор: д-р Питер Марков, владелец и детский стоматолог VK Pediatric Dentistry в Арлингтоне, штат Вирджиния

    У детей могут начать прорезываться зубы уже в 2 месяца, даже если их первый зуб может не прорезаться до 6 лет. месячного возраста.У некоторых детей могут возникнуть проблемы с прорезыванием зубов, а у некоторых может вообще не быть никаких проблем! Если в это время ваш ребенок становится беспокойным, у него увеличивается количество слюны и/или он становится беспокойным и нет другого объяснения, скорее всего, у вашего ребенка режутся зубки. Вот несколько советов, которые помогут облегчить этот процесс.

    Держите рот в чистоте и массируйте десны!

    Еще до того, как прорежутся зубы, сделайте все возможное, чтобы ротовая полость вашего ребенка была чистой. Вы можете сделать это, протерев десны влажной тканью или марлей, чтобы удалить лишний мусор. Силиконовые зубные щетки могут массировать десны (хотя мы рекомендуем перейти на зубную щетку со щетиной, как только прорежется первый зуб).

    Почисти зубы!

    Начните чистить зубы, как только они прорежутся во рту. Это не только поможет облегчить некоторые симптомы прорезывания зубов, но и защитит и очистит зубы. Зубной налет и скопление пищи вызывают воспаление вокруг зубов, что может сделать десны повышенной чувствительности, а ребенка – излишне суетливым.Убедитесь, что вы следуете нашему совету по зубной пасте .

    Охлажденная или замороженная мочалка

    Чтобы уменьшить дискомфорт ребенка, попробуйте положить влажную мочалку в холодильник или морозильную камеру. Если вы поместите его в морозильную камеру, дайте ему оттаять в течение нескольких минут, прежде чем прикладывать к деснам вашего ребенка. Холод может помочь при дискомфорте при прорезывании зубов.

    Кольцо для прорезывания зубов

    К сожалению, прорезывание зубов является естественным процессом, и для его исчезновения может потребоваться время.Естественная реакция на прорезывание зубов — это попытки кусать предметы, поэтому иногда могут помочь зубные кольца. Держитесь подальше от зубных колец, наполненных жидкостью, потому что иногда они могут сломаться, и убедитесь, что зубное кольцо не содержит BPA. Детская стоматология VK рекомендует положить любимое зубное кольцо вашего ребенка в холодильник для достижения наилучших результатов!

    VK Pediatric Стоматология

    5001 Lee Hwy, Arlington VA 22207

    www.smilewithvk.com

    #smilewithvk

    Расписание встречи сегодня в Арлингтоне, штат Вирджиния в VK Pediatric Стоматология

    , если вы убеждены еще не водили ребенка к детскому стоматологу или хотели бы записаться на прием , Dr.Питер и высококвалифицированная команда детской стоматологии VK находятся на расстоянии одного телефонного звонка. Запишитесь на прием онлайн или позвоните нам сегодня по телефону 703-962-7814. Мы будем рады подарить вашим детям здоровые и счастливые улыбки на всю жизнь!!!

    Должен ли я быть обеспокоен замерзшей жидкостью для выхлопных газов дизельных двигателей

    Сейчас, когда температура падает до подросткового возраста, возникает много вопросов относительно замерзшей жидкости для выхлопных газов дизельных двигателей (DEF) . Нет никаких сомнений в том, что твердый или вязкий DEF может привести к кодам ошибок и сбоям в работе оборудования.Будь то в резервуарах для хранения или в оборудовании, DEF может замерзнуть и вызвать проблемы.

    Когда температура упадет ниже 12°F, DEF начнет затвердевать и не будет работать должным образом. Но когда температура снова поднимается и DEF оттаивает, он восстанавливает свою эффективность в качестве катализатора для преобразования вредных выбросов NOx в безопасный азот, воду и следовые количества углекислого газа.

    DEF представляет собой смесь автомобильной мочевины и деионизированной воды. Используемое конкретное соотношение позволяет всей смеси замерзать и оттаивать вместе, как вода и лед.Отдельные компоненты не разделяются и не оказывают отрицательного влияния на эффективность решения. Циклы замораживания и оттаивания не влияют на качество топлива DEF , независимо от того, сколько раз повторяется цикл. Это особенно важно для автомобилей, оснащенных системами селективной каталитической нейтрализации (SCR), которые регулярно эксплуатируются в суровых зимних условиях.

    Большинство производителей оборудования разработали свои системы SCR для работы в течение льготного периода со средствами для оттаивания замороженных резервуаров с DEF и линий подачи до истечения льготного периода.Нагреватели или трубопроводы охлаждающей жидкости часто проходят через раствор, чтобы быстро восстановить производительность системы SCR. Коды ошибок и системные сбои могут возникать, когда эти системы выходят из строя и не работают должным образом. Хотя сбои системы могут вызывать разочарование, никогда не следует добавлять антифриз или другие добавки в бак DEF, так как это поставит под угрозу чистоту и вызовет различные проблемы.

    Если вокруг горлышка контейнера или на вашей системе SCR образовался кристалл DEF, это является признаком испарения, а не повреждения продукта в результате замораживания.По сути, кристаллизация — это признак того, что вода из раствора испарилась, а мочевина просто «высалилась». Кристаллы можно смыть водой, так как DEF не вреден для окружающей среды.

    Для обеспечения работоспособности при любых погодных условиях хранящийся DEF должен храниться при температуре значительно выше нуля. Доступны одеяла с подогревом и другие решения для хранения вещей. В противном случае резервуары и контейнеры должны выдерживать расширение продукта, поскольку продукт может увеличиваться в объеме на 7% по мере того, как он становится твердым.Требуется соответствующий сорт нержавеющей стали или полиэтилена высокой плотности, устойчивый к коррозии, поскольку коррозия может отрицательно сказаться на чистоте продукта.

    Обратитесь к местному специалисту по энергетике FS за безотказными решениями DEF .

    Доставка на Nimbus X: Часть 3. Приключение VK Obsidian • Часть… | Эрик С. Пиотровски

    Приключение VK Obsidian • Часть 1 здесь • Часть 2 здесь

    Фото ActionVance на Unsplash

    Чирва скрежетал зубами, ругался и стучал по панели управления.— Черт возьми, — закричал он. Хопеш подпрыгнула на своем месте и уставилась на него. «Сколько обручей нам нужно перепрыгнуть?» он спросил.

    Она бросила взгляд на Дактиля, который покачал головой и вернулся к карте системы Ню Форнацис на экране. — Все в порядке, — сказала она Чирве. — Нам просто нужно… — Она замолчала и нахмурилась. — Это отстало, — сказала она и указала на него. — Ты должен быть самым спокойным. Она указала на себя большим пальцем. «Я тот, кто должен ругаться и колотить.

    Он махнул рукой и в третий раз изменил их траекторию. «Я могу понять несколько дополнительных шагов, но это абсурд». Он гневно вздохнул. «Ублюдки».

    Дактиль усмехнулся. «Выглядит не очень дзен с твоей стороны», — сказал он. «Я думал, ты должен быть…»

    Photo by Kari Shea on Unsplash

    Чирва подняла руку. — Вы неправильно понимаете, — сказал он.

    Дактиль ждал. Через мгновение он сказал: «Что?»

    «А?» Чирва не сводил глаз с показаний траектории.

    «Чего я не понимаю?»

    «Дзен».

    «Как так?»

    Чирва улыбнулась. — Возможно, я смогу объяснить в другой раз. Он указал на экран. «Когда мы не пытаемся обезопасить опасный пакет».

    Дактиль яростно вздохнул и сделал глоток Cherry Nitrous.

    Их система связи затрещала; Хопеш настроил звук на окружающий звук, чтобы все могли слышать. « Обсидиан », — сказал голос. Их контакт в Nu Fornacis был тонким и водянистым, почти шипящим в пустоте.Больше часа он метался по системе, отмечая координаты и запрашивая информацию.

    Хопеш нажала кнопку на гарнитуре, включив свой звук. «Это Obsidian », — сказала она, позволив своим глазам немного закатиться. «Вперед, продолжать.»

    «Пожалуйста, назовите ваш пароль хамза-девять».

    Чирва посмотрел на динамик рядом с ним на панели управления. «Наш , что за

    Горф заговорил. «Эскендерейя, Фустат, Саманнуд».

    Хопеш улыбнулся.»Ты это понял?» — спросила она в гарнитуру. Я очень на это надеюсь , подумала она, потому что я понятия не имею, что это значит.

    «Подтверждаю», — сказал голос и сделал паузу. «Следующий пункт: ваш контракт содержит набор протоколов шифрования. Обычно они появляются на двух третях документа».

    Чирва вывел контракт Nimbus X на главный экран данных, где все могли его видеть. Он пролистал его и нашел набор таблиц, заполненных цифрами и символами, помеченными Протоколы шифрования .

    Фото Маркуса Списке на Unsplash

    «Ага», — сказал Хопеш. «Мы смотрим на это».

    «Пожалуйста, укажите девятнадцатый код в седьмом квадранте».

    Чирва прошлась по столам и нашла седьмой квадрант. Он воспользовался индикатором, чтобы отметить коды пятерками, и обвел девятнадцатую.

    — Хорошо, — сказал Хопеш. — Это «Черная черепаха…»

    «Задом наперед», — выпалил Горф, перебивая ее.

    Хопеш поднял голову. «Какой?»

    «В моих инструкциях указано, что протоколы контрактного шифрования должны передаваться в обратном порядке.

    «Это смехотворно, — сказал Чирва.

    — Хорошо, — сказал Хопеш и начал с конца списка. «Это «Киноварь-птица юга / Син». А потом «Лазурный дракон Востока / Цзяо». А потом «Черная черепаха с севера / Ши».

    Пауза. «Спасибо, Обсидиан », — сказал голос, после чего последовала более длительная пауза. «Подождите, пожалуйста.»

    Они ждали. Чирва закрыл глаза и прислушался к гулу работающих на холостом ходу двигателей.

    «Спасибо за терпение, Обсидиан », — сказал голос.«Мы подтвердили вашу законную проверку. Добро пожаловать в Ню Форнасис».

    Хопеш почувствовал, как облегчение распространилось по салону. Она откинулась на спинку стула и улыбнулась. — Спасибо, — сказала она.

    «Пожалуйста, проследуйте к Фортунато-7», — сказал он. «Координаты и проекция ландшафта планеты сейчас отправляются на вашу частоту данных».

    — Ого, — сказал Дактиль, прикрепляя навигационный экран к основному дисплею. Хопеш и Чирва пробормотали собственное восхищение, когда появился глобус, завернутый в карту.На дальней стороне планеты медленно пульсировало зеленое пятно. «Должно быть, это то место, где мы приземлимся», — указал Дактиль. Он вернулся к навигационной панели и ввел координаты их последнего захода на посадку.

    «Фортунато-7, да?» — спросил Чирва. Он повернулся к Дактилю. «Если кто-то предложит показать вам модное вино в своем подвале, не ходите с ним».

    «А?» Дактиль бросил на него растерянный взгляд, но Хопеш усмехнулась и покачала головой.

    — Хм, — сказала она через мгновение. — А разве мы не этим занимаемся?

    Чирва посмотрела на нее искоса, а затем перевела взгляд через обзорный экран, когда планета появилась слева от них.

    Фортунато-7 был планетой пышных голубых лугов и лесов, нежных черных горных хребтов и извилистых красных рек. Экипаж Obsidian восхищался стадами животных, резвящихся по полям — одна группа больших и медленных продолговатых бегемотов здесь, другая стайка шустрых и быстрых тварей, снующих вокруг них. Солнце Ню Форнациса освещало атмосферу ярко-оранжевым светом, наполняя местность туманной аурой.

    Фото Кристал Квок на Unsplash

    И тут в поле зрения попала их зона приземления.Все еще пульсируя зеленой точкой на проекционной карте, это была серебряная сетка из кремния, врезанная в планету. Квадрат из чистого серебра излучал стерильность в утреннем свете, покрытый ульем химических резервуаров и центров обработки. Подойдя к ангарным отсекам, они увидели сотни машин и рабочих, кружащихся вокруг объекта.

    Они присели и вышли на яркий дневной свет, усиленный яркой поверхностью под ними. Он был сплошь силиконовый; сплошное серебряное покрывало, охватившее все в поле зрения.Резервуары для хранения были белыми; крыши зданий были покрыты солнечными панелями. Стены были светло-серые. Все остальное было серебром.

    — Добро пожаловать в Фортунато-7, — объявил знакомый тонкий голос. Они посмотрели на него и моргнули с диссонансом. Мускулистое зеленое существо почти восьми футов ростом целеустремленно шагало к ним на четырех ногах. Они почти вращались, когда двигались, чередуя поддержку и движение. Трудно поверить, что такой крупный человек может двигаться так быстро , подумал Хопеш.Он был одет в темно-красную униформу с логотипом молекулы с надписью «ZPC» внутри щита на груди. Длинные усики ниспадали каскадом от макушки существа до середины спины, а его шкура была покрыта черными полосами. Две пары рук — жилистых, но гибких — раскачивались при движении. К паре ремней вдоль его средней части крепилось различное оружие. Три глаза на его лице смотрели со странным чувством решительного спокойствия. За ним следовала пара более мелких розовых сфероидов; один сжимал планшетный компьютер, а другой держал в руках пару черных металлических футляров, каждый из которых был украшен логотипом ZPC.

    intergalactic © zonite products Corporation

    — Спасибо, — пробормотал Хопеш и пробормотал остальным: — , а не ожидал, что он будет так выглядеть.

    — Да, действительно, — сказал Дактиль.

    — Это, — кивнула Чирва. — Или их.

    — Ага, — прошептал Хопеш. «Верно.»

    — Корпорация Zonite Products рада работать с вами, — сказало существо. Достигнув их, он положил верхнюю правую ладонь на нижнюю левую и наоборот, а затем поклонился.Хопеш и остальные ответили на этот же жест, как могли. — Я Фету, — сказал он. «Начальник службы безопасности этого объекта. Я буду контролировать это приобретение».

    — Я Хопеш, — сказала она и указала на остальных. — Это Чирва и Дактиль. Она смотрела, как один из розовых помощников яростно печатает на планшете. Он поддерживал устройство средней рукой, в то время как две большие конечности яростно клевали по клавиатуре тремя пальцами каждая. Она осмотрела комплекс. «Это отличное место», — сказала она.

    — Да, — сказал Фету и поднял руку. — Я могу рассказать тебе об этом, если хочешь. Но сначала я хочу начать загрузку груза. Оно взглянуло на каждого из них. «Это приемлемо?»

    — Ага, — сказал Хопеш. «Конечно.» Она взглянула на остальных, которые пожали плечами.

    Чирва показал большим пальцем. «Позвольте мне показать вам грузовой отсек». Он подошел к задней части Obsidian .

    Фету щебетал второму помощнику на полусвистящем языке. Он, как мог, имитировал лук Фету с гильзами и поспешил за Чирвой.

    — Процесс загрузки займет около часа, — сказал Фету, расправляя усики вдоль затылка. — Я полагаю, вы хотите использовать время с умом.

    Дактиль пожал плечами. «Мы летим уже неделю», — сказал он. «Мы никуда не торопимся…»

    Хопеш поднял руку. — Мы ценим вашу эффективность, — сказала она и посмотрела на Дактиля. Он закатил глаза и сделал глоток Cherry Nitrous. Другую руку он засунул в карман черных брюк. Второй помощник вышел из ангарного отсека и позвал своего спутника.Хопеш посмотрел на них; у каждого из них было по пять глаз, а во рту у них не было зубов. Существо указало на свой планшетный компьютер и обменялось несколькими свистящими словами со своим партнером. Звучит напряженно , подумал Хопеш. Но кто знает? В конце концов, они поспешили обратно в здание, и Чирва присоединился к группе.

    «Как они двигаются так быстро?» — спросил Хопеш, указывая вслед существам.

    Фету пошевелил антеннами и слабо улыбнулся. Он поднял одну ногу и показал тонкую сандалию, перевязанную поверх нее.Хопеш и остальные столпились вокруг, чтобы посмотреть. Нижняя часть представляла собой серебристо-зеленую печатную плату с целой галактикой крошечных компонентов. Фету указал на пол. «Эти устройства позволяют работникам — всем нам — двигаться на 31% быстрее, повышая эффективность и снижая затраты». Оно подняло палец. «И, — продолжил он, — это позволяет работникам больше времени проводить за едой и отдыхать».

    Чирва поднял бровь. — Да, — сказал он невозмутимо. «Более эффективное рабочее место обычно означает лучшую жизнь для работников.

    — Абсолютно, — кивнул Фету. Чирва обменялась взглядами с Хопеш, которая слегка покачала головой. Может быть, они не используют иронию , подумала она. Мы должны его бросить.

    Вместо этого она спросила: «Как долго вы были в этом месте?»

    — Около трех месяцев, — сказал Фету.

    Хопеш замер и переглянулся с остальными. Она сердито посмотрела на Фету. «Мне жаль?»

    Фету кивнул. «Да.» Из-за него появилась линия розовых сфероидных существ.Каждый толкал черный ящик почти такого же размера, как он сам. Спереди красовался логотип ZPC, и Хопеш заметил, что каждый из них опирается на тонкую планку серебристо-зеленой печатной платы. Как и их туфли , подумала она. Умный .

    Фету жестом приказал первому остановиться и снял маленькую печать на верхней части его ящика. Он жестом приказал розовому существу отступить, затем поманил Хопеша и остальных подойти. Они заглянули внутрь и увидели прозрачный цилиндр, окруженный по углам пенопластовой прокладкой.Внутри находилась вязкая бирюзово-серая жидкость.

    Photo by Sime Basioli on Unsplash

    Фету вынул полиэтиленовую пробку из центра бочки и достал пипетку, которую поднес к Хопешу. «Для вашего одобрения», — говорилось в нем.

    Она взглянула на остальных. — Угу, — сказала она.

    Глаза Чирвы расширились от гнева. — Абсурд, — сказал он. — Это все, что нам нужно.

    «Что?» — сказал Дактиль, сердито глядя на Чирву. «Почему бы нет?»

    Чирва недоверчиво моргнул. «Почему , а не ?» — повторил он.— Как вы думаете, что это за штука? Он указал на цилиндр. — Как ты думаешь, что это тебе даст?

    «Откуда мне знать?» — сказал Дактиль, разводя руками. — Разве это не часть веселья?

    «Весело!» — вдруг сказал Чирва. Он покосился на Фету, который все еще пытался предложить пипетку Хопешу или Дактилю.

    Дактиль посмотрел на Хопеша. — Разве ты не этим занимаешься? он спросил. — Попробовать товар?

    — Не знаю, — прошипела она, одарив Фету короткой странной полуулыбкой.«Я никогда раньше не покупал наркотики».

    — Ну да, — сказал Чирва. Хопеш замер и уставился на него. «И первое правило: вы не берете ничего, что не можете идентифицировать».

    — Я тоже, — сказал Дактиль, — и…

    — Какого черта? — сказала Хопеш, вскинув руки. «С каких это пор я путешествую с толпой наркоманов?»

    Дактиль ткнул пальцем в нее, затем в Чирву. «И первое правило в моем опыте: «Не оскорбляй чужой шум». Он выхватил пипетку у Фету, которая улыбнулась.Он толкнул его раненой рукой, отсутствующий палец вызывал некоторые затруднения. Он поддержал его и двинулся к отверстию цилиндра.

    — Я могу предложить, — сказал Фету, мягко подняв руку, — минимально возможную дозу. Он указал на жидкость. «Наши продукты известны своей чрезвычайной эффективностью».

    «Клиенты их обычно разбавляют?» — спросил Хопеш.

    — Очень, — сказал Фету.

    — Как угодно, — сказал Дактиль. «Меня не зря называют Бешеным псом Даком». Он наполнил пипетку на треть и впрыснул ее себе в рот.

    — Не рот, — вдруг сказал Фету, широко раскрыв глаза.

    «Почему бы и нет?» Дактиль сказал — или сказал бы, если бы его рот и голос не застыли на полпути к «не» и не вытянулись и не задержались в воздухе. Он начал пускать слюни и рухнул на землю, все еще напевая гласный звук «не», даже когда он вдыхал и выдыхал.

    Photo by Jr Korpa on Unsplash

    — Фекальный блуд, — сказал Хопеш, опускаясь рядом с ним. «Ты в порядке?» Его глаза приобрели тот же бирюзово-серый цвет, что и жидкость, и слюна ровной струйкой текла на силиконовую землю.Она посмотрела на Фету. «Что нам делать?»

    Он моргнул по очереди каждым из трех глаз. «О чем?»

    «О что ?» — повторила Чирва, махая рукой Дактилу. — Это тебя не касается?

    Фету развел руками. «Его дыхание ровное, а голос звонкий».

    — Ура, — сказал Хопеш. «Он поет». Она поднесла руку к уху. «Послушай, как он держит эту ноту». Дактиль продолжал произносить гласную «не».

    «Почему ты расстроен?» — спросил Фету у Чирвы, который моргнул и заикался.

    «Наш друг в кататонии и пускает слюни на себя», — сказал он.

    Фету протянул все четыре руки к Дактилю. «Он никогда не был в более эйфорическом состоянии», — говорится в сообщении.

    — Ну, — спросил Хопеш, — как, черт возьми, выглядит отрицательная реакция?

    «У 0,13% клиентов, которые сообщают о негативном взаимодействии, — сказал Фету, — наиболее распространенными симптомами являются перебои в работе сердца и инвертированный нейральный цитоз».

    «Его сердце могло остановиться?» Хопеш взвизгнул.

    — Или его… — Чирва посмотрела куда-то вдаль, потом на Фету. «Что такое инверсионный нейрон…»?

    «Очень неприятная травма головного мозга, — сказал Фету с пустым лицом, — в 99,4% случаев быстро заканчивалась смертью».

    Хопеш снял шляпу Дактиля и провел рукой по его грязным каштановым волосам. Она вздохнула и слушала, как он продолжает свой гласный звук.

    Фету перевел взгляд с нее на Чирву. — Ты выглядишь расстроенным, — сказал он. «Позвольте мне вызвать медицинского ксенофизиолога.Он повернулся и заговорил с одним из розовых существ, которые убежали в помещение.

    Через мгновение к ним присоединился другой представитель вида Фету. Он был одет в белую форму с множеством красных значков — крестом, полумесяцем, звездой, атомом водорода и некоторыми другими — на лацканах. В нем была пара коробок, каждая из которых была отмечена логотипом ZPC.

    — Алиси — эксперт по двенадцати видам, — сказал Фету, когда медик поставил ящики. «Включая людей». Оно указало на Дактиля и прошептало несколько слов.

    Алиси открыла один из кейсов и достала продолговатое устройство. Он помахал палкой возле лба Дактиля и запищал. — Тридцать семь целых две четверти четыре градуса, — объявил он и посмотрел на Фету. «Голос звонкий».

    Хопеш и Чирва переглянулись. — Ага, — наконец сказала Чирва. — Это точно.

    — Ты звучишь обеспокоенно, — сказала Алиси.

    Хопеш взмахнул рукой. «Обычно он не пускает слюни на себя и не издает такого шума».

    Алиси посмотрела на Фету.— Какой шум он обычно издает?

    Фету прошептал несколько слов, и Алиси кивнула. Он сказал несколько назад, но Фету покачал головой. Фету прошептал еще одно слово, которое Алиси громко повторила. Оно посмотрело на Хопеша. «Зачем он налил жидкость себе в рот?»

    Хопеш вздохнул. «Полагаю, ваше исследование людей не дошло до того, что мы проглатываем большую часть пищи через рот».

    Чирва кивнул на цилиндр. «Как это обычно воспринимается?»

    — После разбавления, — сказала Алиси, многозначительно глядя на Фету, — его чаще всего наносят на тыльную сторону ладони.Он потянул одно веко Дактиля. «Глоточный канал значительно увеличивает эффективность дозы».

    «И как долго он будет таким?» — спросил Хопеш.

    Photo by v2osk on Unsplash

    Одним быстрым плавным движением Алиси скользнула рукой под голову, плечо, талию и ногу Дактиля. Он поднял его в воздух, а затем осторожно опустил обратно на пол. Он обменялся несколькими свистящими словами с Фету, затем посмотрел на Хопеша. — Еще девятнадцать минут, — сказал он. Он положил палочку обратно в футляр и достал иглу для подкожных инъекций.

    «Вау», сказала Чирва. «Для чего это?»

    Алиси вытащила из футляра небольшой пузырек и стала черпать из него иголкой. «Мягкое производное аллилнороксиморфона», — говорилось в нем. «Это будет…» Он посмотрел в сторону, найдя слово. «Смягчи толчок его пробуждения». Он сделал инъекцию в руку Дактиля, спрятал иглу и пузырек, а затем уставился на Хопеша. «Не позволяйте ему больше глотать это вещество через рот», — говорится в сообщении.

    — Не волнуйся, — сказал Чирва.»Фактически.» Он подошел к цилиндру, взял пробку у Фету и запечатал цилиндр. Он закрыл крышку и запер ее, затем помахал розовому существу, ожидавшему поблизости. «Загрузи это».

    Фету кивнул розовому существу, затем помахал остальным. Они начали перетаскивать ящики к грузовому отсеку Obsidian .

    Дактиль протер глаза и застонал. — Святое дерьмо, — сказал он и вытер мокрую щеку. «Что случилось?» Он огляделся, его зрение было расплывчатым. — Хоп? — пробормотал он.»Это ты?»

    — Да, — сказала она и закрыла книгу. «Не пытайся встать». Она сунула книгу в карман своих темно-зеленых брюк и опустилась на колени рядом с ним.

    Он огляделся и протер глаза. «Где я?»

    — Мы на Фортунато-7, — сказала она. «В ангарном отсеке рядом с Obsidian ». Она указала на корабль, где поток маленьких розовых существ тащил ящики к корме корабля. Она поднесла руку ко рту и закричала: «Он встал!»

    — Хорошо, — сказала Чирва изнутри корабля.

    Дактиль заставил себя сесть и вытянул ноги. «Что это за штука?» — спросил он, указывая на брезентовую палатку над головой.

    «Фету поместил его, чтобы защитить тебя от солнца», — сказала она. «Медик сказал, что в этом нет необходимости, но Фету настоял». Она наклонилась ближе к нему и понизила голос. «Я думаю, может быть, он думает, что мы из Nimbus X».

    — Эй, — сказал Дактиль, пожимая плечами. «Пойдем с этим».

    Фото Джозефа Грева на Unsplash

    Чирва подошел со стаканом воды.Дактиль взял его, заглянул внутрь и посмотрел на Чирву.

    — Выпей, — сказал Чирва. Его лицо было грязным от работы в грузовом отсеке.

    «Дайте мне…»

    «Сначала выпейте это», — сказал Чирва, его глаза были убийственными.

    Дактиль вздохнул. — Хорошо, — сказал он. Он быстро выпил, опустошив стакан, и рыгнул. — Уф, — сказал он. «Мне это было нужно.» Он вернул чашку Чирве, которая приподняла бровь и задумалась. Затем он вытащил из кармана жилета канистру Cherry Nitrous и передал ее.— А-а, — сказал Дактиль и выпустил газировку.

    — Итак, — сказал Хопеш. «Как это было?»

    Дактиль вытер рот тыльной стороной ладони. Он задумался на мгновение. — Интенсивно, — сказал он наконец. «Трудно описать». Он огляделся. — Этот контейнер все еще открыт?

    Хопеш посмотрел на него. «Ты не можешь быть серьезным.»

    — Я разбавлю, — сказал он, указывая на Закись.

    Она посмотрела на Чирву, который с улыбкой покачал головой. — Невероятно, — сказала она и встала.«Ты никогда больше не прикоснешься к этой штуке». Она указала на грузовой отсек. — Покажи мне, — сказала она Чирве. Они разбрелись.

    Дактиль наблюдал, как розовые рабочие тащили ящики мимо его палатки. Один из них, ехавший на пустом транспортном средстве, похожем на скейтборд, замедлил шаг, приблизившись. Дактиль понял, что тот смотрит на его руку. — О, — сказал он, сгибая оставшиеся пальцы. — Не волнуйся, — сказал он. «Потерял его в бою с какими-то инопланетянами-щупальцами». Он улыбнулся.

    Существо взглянуло на Фету, которого отвлекли его помощники с планшетным компьютером и чехлами.Затем он с тоской посмотрел на Дактил.

    — О, — сказал он, поняв, куда были прикованы глаза существа. Он поднял контейнер. «Вишня. Закись азота, — сказал он, пытаясь произносить слова негромко. Маленький парень явно робкий. Может быть, он боится попасть в беду. Он поднес канистру рабочему. — Хочешь попробовать?

    Он удивленно посмотрел на него и сошел с транспортного средства. Он упал на колени и вытянул все три руки в странной прострации.

    Дактиль пожал плечами и встал. Он вложил Cherry Nitrous в его среднюю руку. Существо схватило его и начало пыхтеть. «Привет!» — сказал Дактиль и пошел за напитком. Существо вскочило на ноги и увернулось, глотая и засасывая его. — Я сказал, что ты можешь сделать глоток.

    Фету подбежал и прошептал несколько слов, когда существо вернуло канистру Дактилю. — Что делает этот рабочий? — спросил Фету.

    Дактиль встряхнул пустую канистру. «Я дал этому парню глоток своего напитка, и он выпил его целиком.

    Глаза Фету распахнулись, и он вытащил из-за пояса большой бластер. Розовый рабочий поспешил за Дактилем, который широко раскрытыми глазами смотрел на Фету.

    «Вау», сказал он, подняв руки. «Что делаешь?»

    — Удаляю этого вредителя, — сказал Фету, искренне сбитый с толку. Он держал бластер в стороне. — Я должен был попросить тебя избегать общения с ними.

    — Тебе не нужно убивать его, — сказал Дактиль и похлопал рабочего левой рукой. — Ты не можешь просто предупредить его или что-то в этом роде?

    Фету терпеливо посмотрел на Дактил.«Корпорация Zonite Products имеет очень четкую политику в отношении отношений между работниками и клиентами», — сказал он и указал на рабочего. «Этот… человек был всесторонне обучен этой политике. Он очень хорошо знает, каковы последствия отклонений». За этим последовала череда слов шепотом, отчего рабочий застонал в ответ.

    — Ну, — сказал Дактиль, его мысли кружились. — Я хочу, чтобы ты оставил его в покое. Эй, подумал он. Этот парень думает, что мы из Nimbus X, верно? «Мы не… э-э, если мои… работодатели узнают, что рабочий был убит во время этого пикапа, они очень разозлятся.Он попытался встать прямо.

    Фету поднял голову. «Контракт, отправленный нам, явно отклонял пункт о производственной морали».

    А? Дактиль подумал. Что, черт возьми, это значит? Он моргнул. «Ну, — сказал он, — я не знаю, что они вам сказали, но с нами они были очень ясны». Он немного повернулся и указал на существо. «Вы не должны причинять вред этому рабочему».

    Фету сделал странное выражение лица, которое Дактиль не мог прочитать. Он сказал несколько слов шепотом и взмахнул двумя левыми руками.Розовое существо схватило свое транспортное средство и побежало обратно в помещение.

    Фету холодно посмотрел на Дактиля и кивнул. Дактиль кивнул в ответ.

    «Сколько это стоит?» — спросил Хопеш, наблюдая за тем, как рабочие тащат ящик за ящиком продукции.

    Фету поднял руку, и очередь остановилась. Фету обменялся шепотом с ассистентом, сжимавшим планшет, затем указал на первого рабочего и жестом приказал ему двигаться снова. «Это 79.2, — сказал он и указал на следующий за ним. «Пункт четыре». А тот, что за ним: «Точка с—»

    Фото Стивена Рэдфорда на Unsplash

    Вокруг них со всех сторон грянули взрывы. Лазерные разряды пронзили воздух, и маленькие розовые существа начали кричать. Фету вытащил из-за пояса два оружия и начал стрелять по объекту. Ему каким-то образом удалось прокричать что-то шепотом в воздух, и розовые существа разделились на две группы — одна направилась к грузовому отсеку «Обсидиан », другая — обратно в комплекс ZPC.Фету махнул Хопешу и Дактилу, чтобы они присоединились к Чирве на корабле. «Внутри!» оно звонило.

    «Что происходит?» — спросил Дактиль, пригибаясь и отмахиваясь от дыма. Лазерный разряд попал в бок одному из розовых существ, и оно развернулось, его транспортировочное устройство соскользнуло прочь. Он упал на землю, не шевелясь. «Святое дерьмо!» — крикнул Дактиль.

    — На свой корабль, — рявкнул Фету. — Иди сейчас. Он устремился к объекту и оттолкнул Хопеш, когда мимо нее пролетело устройство с звуковым сигналом. Он приземлился в десяти метрах и взорвался.Дактиль поднял руку против летящих обломков. Они забрались на борт и, обернувшись, увидели снаружи Фету, который смотрел вниз на двух других представителей своего вида.

    — Чирва, — крикнул Хопеш в сторону грузового отсека, нажимая кнопки на пульте управления. «Мы взлетаем. Закрой его!»

    — Уже закрываюсь, — отозвался Чирва. Хопеш пробежался по контрольному списку запуска с удвоенной скоростью и жестом приказал Дактилу закрыть шлюз.

    — Подожди, — сказал Дактиль через плечо. «Чувак засунул ногу в дверь.Хопеш оглянулся и увидел, что одна из ног Фету действительно прижата к стене внешней двери.

    Фету вдруг завопила в регистре даже выше, чем обычно. Он говорил взрывом слогов и гортанных пауз, и два других отвечали так же. Они несколько раз кричали друг на друга, и Фету направил на каждого из них по одному бластеру. Напряжение нарастало, когда они обменивались странными инопланетными словами. Затем Фету выстрелил в того, что справа, и с криком уронил его. Другой выстрелил в ответ, но Фету погрузился в Обсидиан , и взрыв снаружи потряс корабль.

    — Мы должны покинуть планету, — сказал Фету, указывая на Хопеша.

    — Подожди, — сказала она и уставилась на индикатор двери грузового отсека. Наконец он мигнул зеленым, и она включила зажигание. Кренясь, Обсидиан прыгнул ввысь и оторвался в небо. Было слышно, как бластерный огонь врезался в щиты.

    Photo by Francesca LIBARDI on Unsplash

    — У нас даже нет полной партии, — сказал Дактиль, вскинув руки. «Они не собираются платить нам за частичную поставку.

    — Возможно, мы получим частичную оплату, — сказал Чирва, вытирая руки серым полотенцем, выходя из трюма.

    — Или, — сказал Дактиль, подняв израненную руку, — может быть, нас частично расчленят.

    — Ничего из этого не произойдет, — сказал Фету и рухнул в навигационное кресло Дактиля. «Я могу заверить вас.» Он опустил антенны вниз по бокам головы и глубоко вздохнул. — Я буду залогом оставшейся части груза.

    — Конечно, — тихо сказал Дактиль. — Можешь сидеть там.

    Через несколько минут Хопеш направил Obsidian в автодрейф к спиралям Нимбуса. — Хорошо, — сказала она, повернувшись к Фету. — Что, черт возьми, там произошло?

    — Я надеялся избавить вас от этой неприятности, — сказал Фету. «Все запуталось, и ты оказался в центре всего этого».

    Хопеш сердито посмотрел на существо. Его огромное тело было абсурдным несоответствием креслу Дактиля, и он сидел, сгорбившись, с покорностью, несовместимой с его обычной военной выправкой.— Середина чего? она сказала. «Мы подписались на одну доставку». Она подняла палец и указала на него. «Вход, выход, готово».

    Фету посмотрел на нее со странной смесью жалости и напряженности. «Боюсь, это больше не вариант», — говорится в сообщении. То же самое было и с Дактилем, и с Чирвой. — Надеюсь, у тебя не было никаких планов.

    На этом Часть 3 заканчивается. Часть 4 читайте здесь .

    Лекарства с истекшим сроком годности могут оставаться эффективными и безопасными для использования в крайнем случае

    (Reuters Health) — Даже лекарства, срок годности которых истек несколько лет и которые не всегда хранились в строгих климатических условиях, могут сохранять свою первоначальную эффективность. , предполагает небольшое исследование.

    ФОТОГРАФИЯ: Использованные блистерные упаковки с лекарствами, таблетками и пилюлями видны на этой иллюстрации, сделанной 30 июня 2018 года. REUTERS/Russell Boyce

    Это хорошая новость для людей, работающих в отдаленных районах мира, где иногда просроченное лекарство — единственное доступное, а альтернатива — отсутствие способа вылечить серьезное заболевание, пишут авторы исследования в журнале Wilderness & Environmental Medicine.

    «Срок годности на упаковке лекарственного средства — это последняя дата, когда фармацевтическая компания гарантирует содержание и стабильность лекарственного средства при хранении в рекомендуемых условиях и в оригинальной упаковке», — сказал ведущий автор исследования д-р.Эмма Браун из Медицинского подразделения Британской антарктической службы в Плимуте, Великобритания.

    «Эта дата не обязательно является точкой, в которой лекарство становится неэффективным или опасным, и для многих лекарств это окно может быть намного длиннее, чем обычный срок годности в два-три года», — сказала она Reuters Health по электронной почте. .

    В некоторых частях мира врачи сталкиваются с трудностями при получении лекарств чаще одного раза в год. Она также добавила, что для небольших сообществ или экспедиционных групп замена неиспользованных лекарств «на всякий случай» может быть дорогостоящей.

    «Врач должен решить, безопаснее ли дать просроченное лекарство или не лечить заболевание и надеяться, что человеку станет лучше, что является огромной этической дилеммой», — сказала она. «По мере того, как мы расширяем границы исследований, например, с помощью миссий на Марс, долгосрочная стабильность лекарств становится еще более важной».

    Исследовательская группа проверила стабильность пяти лекарств с истекшим сроком годности, которые были возвращены Британской антарктической службой, которая управляет пятью базами и двумя кораблями в антарктическом регионе и имеет медицинские и стоматологические учреждения на территории.Лекарства для антарктической операции ежегодно заказываются в мае и отправляются из Великобритании в сентябре, прибывая на базы в декабре после нескольких месяцев пребывания в море, отмечают исследователи.

    Свежие наркотики, отправленные в Антарктиду, перевозятся в трюме корабля, в котором не регулируется температура, и судно проходит через тропики примерно три недели, после чего в конечном итоге наркотики доставляются на базу при температурах намного ниже нуля. Авторы добавляют, что препараты, протестированные командой Брауна, совершили эту поездку во второй раз, когда их вернули, потому что у них истек срок годности.

    Они протестировали пять типов лекарств, срок годности которых истек от одного до четырех лет, и сравнили их со свежими образцами тех же лекарств, чтобы убедиться, что версии с истекшим сроком годности химически стабильны и сохранили свой активный ингредиент.

    Лекарства включали атропин, который используется для лечения некоторых видов отравлений пестицидами или нервно-паралитическими агентами; нифедипин, блокатор кальциевых каналов, который расслабляет сердце и кровеносные сосуды в случаях высокого кровяного давления и болей в груди; флуклоксациллин, антибиотик пенициллинового ряда; бендрофлуметиазид, диуретик, используемый для лечения гипертонии; и напроксен, нестероидное противовоспалительное (НПВП) обезболивающее.

    Исследователи обнаружили, что все испытанные препараты были стабильны и теоретически должны были оставаться эффективными. Исследователи предупреждают, что их результаты ограничены тем фактом, что они не знали точных температурных воздействий, которым подвергались возвращенные лекарства.

    «Даже в западных медицинских учреждениях актуальным вопросом является истинная продолжительность действия лекарств, — сказал Браун. «Существует огромное количество лекарств, которые выбрасываются из-за того, что у них истекает срок годности, и это расходы, которые перекладываются на население через налоги, страховку или другие медицинские счета.”

    Срок годности и данные о стабильности было бы полезно обсудить с точки зрения национальных запасов противоядий для биотерроризма и химического оружия, отметил доктор Патил Армениан из Калифорнийского университета в Сан-Франциско во Фресно, который не участвовал в исследовании. .

    Армянин изучил срок годности налоксона, спасательного средства при передозировке опиоидами, и обнаружил, что он не так стабилен при воздействии тепла. Она отметила, что если оставить их в машине жарким летом в Аризоне, Калифорнии или других горячих точках, некоторые лекарства могут разлагаться быстрее.

    «Для повседневного использования потребители должны продолжать придерживаться рекомендуемых сроков годности», — сказал Браун. «Но это открывает двери для дальнейших исследований того, как сроки годности должны отражать истинную долговечность лекарств, хранящихся в реальных условиях окружающей среды».

    ИСТОЧНИК: bit.ly/2T6gGtg Wilderness & Environmental Medicine, онлайн, 1 февраля 2019 г.

    Frontiers | Белки, связывающие лед, в растениях

    Введение

    Рост растений сильно зависит от температуры, которая определяет как географический диапазон, в котором можно выращивать растения, так и потенциальную урожайность.За исключением тропических зон, отрицательные температуры могут наблюдаться почти везде, что делает ущерб от замерзания глобальной проблемой. Растения различаются по своей «морозостойкости» в зависимости от уровня низкотемпературного стресса, который они могут переносить. Многие сельскохозяйственные культуры умеренного пояса, включая табак, томаты, картофель, кукурузу и яблоки, а также некоторые декоративные растения, такие как импатиенс, бегонии и флоксы, считаются «очень нежными» или «полузимостойкими» и повреждаются при замерзании при температуре от 0 до -4°. С. Таким образом, минусовые температуры ранней весной и поздней осенью не только сокращают вегетационный период, но и приводят к значительным потерям урожая.Например, около 2 миллиардов долларов США было потеряно при урожае цитрусовых из-за одного заморозка в Калифорнии в 2013 году (Министерство сельского хозяйства США, Национальная служба сельскохозяйственной статистики). Совсем недавно весенние заморозки в Австрии привели к разрушительным 80-процентным потерям общего урожая фруктов, что привело к ущербу на сумму более 100 миллионов евро (Статистика Австрии).

    Повреждение растительных клеток неизменно возникает в результате роста кристаллов льда во внеклеточном пространстве (рис. 1А; Guy, 1990; Pearce and Ashworth, 1992; Wisniewski et al., 1997). Рост крупных кристаллов льда за счет более мелких происходит посредством термодинамически благоприятного процесса, известного как рекристаллизация льда. Клетки могут подвергаться механическим повреждениям или клеточной дегидратации в результате секвестрации внутриклеточной воды, вызванной осмотическим дисбалансом, вызванным исключением растворенных веществ из перекристаллизованного льда (Steponkus, 1984; Pearce, 2001). Это может иметь разрушительные последствия для клеточного метаболизма, связанные с инактивацией или денатурацией белков и увеличением количества активных форм кислорода (Thomashow, 1998).Если дегидратация тяжелая, потеря объема клеток может также способствовать коллапсу мембранных структур, что приводит к лизису клеток.

    РИСУНОК 1. (A) Стресс от замораживания и защита растений от замерзания, вызванная белками, связывающими лед (IBP). В отсутствие IBP в апопласте образуются крупные кристаллы льда, которые могут физически повреждать плазматические мембраны (1). Когда молекулы воды соединяются с кристаллической решеткой льда, формируется осмотический градиент (2), что приводит к секвестрации внутриклеточной воды и последующему обезвоживанию клеток (3).Потеря объема клеток может привести к коллапсу или разрыву клеток (4). Индуцируемая акклиматизацией к холоду экспрессия IBP, которые обычно секретируются в апопласт (1), адсорбируются на затравочных кристаллах льда, предотвращая их рост (2). IBP также могут предотвращать замораживание, связанное с образованием нуклеации бактериального льда (3). (B) Локализация и посттрансляционная модификация связывающих лед белков у растений. Большинство IBPs растений содержат амино-концевые сигналы секреции и локализованы в апопласте через эндоплазматический ретикулум (ER)-аппарат Гольджи.Некоторые из этих белков (LpIRI3 и BdIRI1-7), по-видимому, гидролизуются после секреции, высвобождая домен LRR из домена, связывающего лед. LpIRI2, в котором отсутствует сигнальный пептид, секретируется, вероятно, неклассическим путем секреции. Немногие IBP были локализованы во внутриклеточном пространстве. Гликозилированные белки обозначены красным, негликозилированные – синим. ИБП именуются в соответствии с таблицей 1.

    Чтобы предотвратить ущерб от заморозков, производители могут использовать пассивные подходы, включая выбор оптимального участка, расчистку земли, управление почвой или выбор сортов культур, которые менее чувствительны к температуре.В качестве альтернативы они могут использовать активные подходы, такие как укрытие посевов, использование дымовых облаков, ветряных машин, орошение водой или отопление (Lindow, 1983). Однако эти методы имеют свои ограничения и требуют быстрого выполнения. Чтобы снизить вероятность заморозков, производители могут вместо этого выбрать посев в конце сезона, хотя отсрочка посева имеет свои риски, включая снижение потенциальной урожайности. Поэтому важно, чтобы мы разрабатывали новые технологии для предотвращения повреждений от замерзания, такие как изучение механизмов защиты, адаптированных к устойчивым к заморозкам растениям, которые могут способствовать развитию более устойчивых культур.

    Связывающие лед белки (IBP) представляют собой одно из таких семейств низкотемпературных белков, обнаруженных у некоторых устойчивых к холоду животных и микробов, а также у некоторых морозоустойчивых растений. Эти белки служат для контроля роста кристаллов льда и смягчения повреждений от замораживания (рис. 1А). IBP растений, по-видимому, особенно эффективно адсорбируются на кристаллах льда, тем самым предотвращая миграцию молекул воды при температурах, близких к температуре замерзания, или в условиях замораживания-оттаивания. Это свойство известно как ингибирование рекристаллизации льда (IRI).Из-за этих функциональных свойств растительные IBP также были известны как белки-антифризы (AFP) или белки IRI.

    IBP растений, вероятно, много раз развивались независимо друг от друга (Gupta and Deswal, 2014b). Это разнообразие привело к множеству других функций, связанных с реакцией на биотический и абиотический стресс, включая, что наиболее важно, ингибирование образования нуклеации бактериального льда, которое в противном случае привело бы к замерзанию при высоких минусовых температурах (Tomalty and Walker, 2014; Bredow et al. ., 2017). Действительно, широкое распространение IBP среди различных видов растений указывает на их важность для устойчивости к заморозкам, а также подчеркивает их возможную полезность для создания устойчивых к заморозкам культур.

    Низкотемпературный стресс и адаптация

    Зарождение льда и стресс от замораживания в растениях

    Место зарождения льда, а также температура, при которой происходит зародышеобразование, являются основным фактором, определяющим меру повреждения от обморожения. Кристаллы льда образуются, когда молекулы воды соединяются, образуя «ледяное ядро», служащее точкой инициации для окружающей воды, чтобы сформировать кристаллическую решетку льда.Гомогенная нуклеация может происходить спонтанно при очень низких отрицательных температурах (ниже -40°С). Однако образование кристаллов льда происходит при более высоких температурах за счет гетерогенного зародышеобразования, катализируемого присутствием пыли, солей, органических молекул или бактерий, образующих кристаллы льда (INA) (Pearce, 2001). Помимо самого льда, бактерии INA являются наиболее эффективными известными гетерогенными зародышами. Однако растения не являются полностью уязвимыми и способны переохлаждать свои жидкости, в некоторых случаях до температуры ниже -5 или -10°C (Arny et al., 1976; Марселлос и Сингл, 1979; Линдоу, 1983). Тем не менее, зародышеобразование может происходить внутри или снаружи на поверхности растительных тканей, при этом лед проникает через устьичные отверстия, гидатоды или через трещины на поверхности кутикулы (Ashworth and Kieft, 1995; Wisniewski and Fuller, 1999; Pearce and Фуллер, 2001).

    У растений жидкости обычно содержатся в двух компартментах: симпласте, который включает воду в цитозоле и центральной вакуоли, и апопласте, состоящем из воды в просвете ксилемы, клеточной стенке и внеклеточном пространстве, окружающем клетки (Кэнни, 1995).Поскольку апопласт обычно имеет более высокую температуру замерзания и является первой точкой доступа для внешних зародышей кристаллизации льда, кристаллы льда обычно сначала появляются в апопластическом пространстве. Однако при быстром падении температуры внутриклеточные кристаллы льда также могут образовываться, вызывая необратимое повреждение клеток (Steponkus, 1984). Таким образом, апопласт действует как граница между жизненно важными внутриклеточными компонентами и внешней средой, и для выживания нуклеация льда должна быть ограничена апопластом.

    Акклиматизация к холоду

    Многолетние, двулетние и выносливые однолетние растения из умеренных и полярных регионов научились приспосабливаться к низким температурам без значительного ущерба, чтобы перезимовать, произвести семена и/или пережить сезонные морозы.Биохимические, метаболические и физиологические изменения, которые позволяют растениям выдерживать низкотемпературный стресс, приобретаются в результате воздействия низких температур и/или укорочения светового дня перед заморозками — процесса, известного как акклиматизация к холоду (Thomashow, 1999). Обычно такие изменения проводят осенью, чтобы подготовиться к приближающемуся зимнему сезону.

    Степень, до которой растение может акклиматизироваться, в значительной степени зависит от основного генетического фона, а также от условий окружающей среды, включая минимальную температуру и продолжительность воздействия холода.Возможно, неудивительно, что более суровые условия окружающей среды могут привести к большей способности акклиматизироваться к низким температурам. Например, после акклиматизации к холоду горчица Arabidopsis thaliana , обычно чувствительная к заморозкам, имеет максимальную устойчивость к замерзанию примерно -12°C по сравнению с -5°C, наблюдаемой у неакклиматизированных растений (Wanner and Junttila, 1999). Напротив, акклиматизированная к холоду морозостойкая озимая пшеница и кормовые травы выживают при температуре ниже -25°C, в то время как некоторые растения из арктических и альпийских регионов могут выдерживать температуры ниже -50°C (Sakai and Larcher, 1987; Moriyama et al., 1995; Йошида и др., 1997). Следует отметить, что температура — не единственная переменная, влияющая на акклиматизацию к холоду; способности к заморозкам изменяются как в зависимости от фотопериода (Fuchigami et al., 1971; Wanner and Junttila, 1999; Welling et al., 2002), так и на стадии развития во время воздействия (Mahfoozi et al., 2001).

    Уровень защиты от замерзания во многом определяется способностью растения защищать плазматические мембраны от повреждений. По этой причине модификации плазматической мембраны являются одними из первых изменений, наблюдаемых после холодовой акклиматизации.К ним относятся изменения в составе липидов в сторону большей доли ненасыщенных жирных кислот (Steponkus et al., 1988), а также изменения в составе белков, которые изменяют пути передачи сигнала и позволяют мембранам взаимодействовать с криозащитными белками (Uemura and Yoshida). , 1984). Поскольку обезвоживание клеток является одним из наиболее разрушительных последствий замораживания, метаболизм перенаправляется на выработку низкомолекулярных криопротекторов, включая фруктан, пролин и глицин-бетаин, а также растворимых сахаров (а именно рафинозы и трегалозы) и сахарных спиртов (сорбит и инозитол) (Hughes and Dunn, 1996; McNeil et al., 1999; Томасшоу, 1999; Хинча и др., 2000; Красенский и Йонак, 2012; Абейнаяке и др., 2015). Накопление миллимолярных количеств этих совместимых растворенных веществ в цитоплазме помогает регулировать осмотический баланс между клеточными компартментами для борьбы с обезвоживанием клеток.

    Изменения в экспрессии генов имеют решающее значение для регулирования и поддержания холодовой акклиматизации. В качестве ранней реакции на низкую температуру происходит метилирование ДНК с гиперметилированием, обеспечивающим стабильность ДНК (Kovalchuk et al., 2003). Однако во время акклиматизации к холоду наблюдаются динамические изменения метилирования ДНК (Baulcombe and Dean, 2014), связанные с полногеномными изменениями экспрессии, включая активацию таких защитных белков, как белки, регулируемые холодом (Thomashow, 1998), доменные белки холодового шока (Thomashow, 1998). (Sasaki, Imai, 2012), дегидрины и другие белки, ассоциированные с поздним эмбриогенезом (Thalhammer, Hincha, 2013; Thalhammer et al., 2014; Nakayama et al., 2014; Takahashi et al., 2014), и белки теплового шока ( Чжан и др., 2008). Другие изменения, в том числе эпигенетические модификации, имеют решающее значение для стабилизации мембран, удаления активных форм кислорода и поддержания активности ферментов. IBP, которые также индуцируются акклиматизацией к холоду, ограничивают повреждение клеток, связанное с замораживанием, и были зарегистрированы, хотя и не полностью охарактеризованы, у десятков растений. Активация механизмов защиты растений и белков, связанных с патогенезом (PR) (Gaude et al., 2003), также важна, учитывая повышенный риск заражения психротолерантными видами микробов, которые сами по себе могут обладать механизмами защиты от замораживания.

    Белки, связывающие лед, и защита от замерзания

    Белки, связывающиеся со льдом, функционально и структурно различаются и были идентифицированы в ряде биологических царств у таких разнообразных видов, как рыбы (DeVries et al., 1970), насекомые (Duman and Patterson, 1978; Duman, 2015), водоросли ( Raymond et al., 2009), микробы (Gilbert et al., 2004) и растения (Griffith et al., 1992). Неизменной особенностью этих белков является их уникальная способность адсорбироваться на льду и модифицировать его рост.Эволюционировав независимо несколько раз, неудивительно, что IBP обладают высоким функциональным и структурным разнообразием (Davies, 2014; Bar-Dolev et al., 2016). В некоторых случаях IBP выполняют вторичные функции, явно не связанные с понижением температуры замерзания, включая активность PR (Griffith and Yaish, 2004), регуляцию транскрипции (Huang and Duman, 2002), стабилизацию мембран (Tomczak et al., 2002), адгезию к льду ( Guo et al., 2012) и структурирование льда (Raymond, 2011). Связывающие со льдом свойства IBP могут быть, по крайней мере частично, объяснены стратегией выживания, используемой хозяином.Некоторые организмы приняли подход предотвращения замерзания и позволяют своим жидкостям переохлаждаться ниже температур, обычно встречающихся в их окружающей среде, тем самым избегая образования кристаллов льда. Напротив, стратегия выживания, устойчивая к замораживанию, допускает некоторый рост кристаллов льда, одновременно индуцируя механизмы, предотвращающие повреждения, связанные со стрессом от замораживания. Растения могут адаптировать любую из этих стратегий. Например, семена могут избежать замерзания, перезимовав при небольшом содержании воды или понизив температуру замерзания за счет накопления сахаров и полиолов (Wisniewski et al., 2014). С другой стороны, растения могут переносить замораживание, акклиматизируясь к холоду и используя IBP для защиты клеток (Thomashow, 1998).

    Активность связывания со льдом была выявлена ​​более 50 лет назад с первоначальным наблюдением понижения точки замерзания у насекомых (Ramsay, 1964), а затем с характеристикой антифризного гликопротеина у антарктических рыб (DeVries et al., 1970). IBP традиционно классифицируют на основе их способности подавлять температуру замерзания растворов по сравнению с равновесной точкой плавления, создавая тепловой гистерезис (TH) (DeVries et al., 1970). Большинство IBP, идентифицированных у рыб, умеренно активны, с активностью TH до 2°C, достаточной для предотвращения летального замерзания интерстициальных жидкостей в покрытых льдом океанах (Fletcher et al., 2001). Гиперактивные IBP, выявленные у некоторых насекомых, наземных членистоногих, бактерий и некоторых полярных рыб, способны снижать температуру замерзания на 2–13°C (Scotter et al., 2006). Таким образом, IBP из этих групп организмов обычно известны как AFP. В отличие от этих примеров, IBP растений имеют низкий TH, обычно в долях градуса.

    ИБП растений были обнаружены 25 лет назад при их описании у озимой ржи (Griffith et al., 1992). Как показано, растительные белки обладают низкой ТГ-активностью (0,1–0,5°С, Griffith, Yaish, 2004; Gupta, Deswal, 2014b). Заметным исключением являются зарегистрированные, но еще не охарактеризованные виды ели ( Piceae sp.) с ТГ-активностью ~2°C (Jarzabek et al., 2009). Поскольку переохлаждение может способствовать образованию внутриклеточного льда и быстрому, потенциально катастрофическому росту кристаллов льда, замораживание при температурах, близких к равновесной точке замерзания, приводит к более высокой выживаемости (Gusta and Fowler, 1977; Gusta et al., 2004). Таким образом, вполне разумно, что растения предпочитают IBP с низким TH, что может обеспечить более контролируемый рост кристаллов льда (Levitt, 1980). Несмотря на свой характерный низкий уровень TH, многие IBP растений отличаются превосходной способностью ограничивать рост кристаллов льда при микромолярных концентрациях (всего 3 мкг/мл для Lp AFP; Lauersen et al., 2011) (таблица 1). свойство, известное как ИРИ (Найт и Думан, 1986). Небелковый гликолипид также был идентифицирован в горько-сладком паслене, Solanum dulcamara , в дополнение к гликозилированному IBP.Гликолипид, состоящий из повторов дисахаридов маннозы-ксилозы, обладает относительно высокой ТГ-активностью (∼3°C; Walters et al., 2011).

    ТАБЛИЦА 1. Активность идентифицированных льдосвязывающих белков в растениях и их сходство с другими белками.

    Удивительно, что до недавнего времени не было официальных доказательств того, что IBP придают своим хозяевам устойчивость к замораживанию, поскольку ни в одном организме не было сделано ни одного нокдауна гена. Первый нокдаун активности связывания льда у любого организма был достигнут у костра пурпурного Brachypodium distachyon с использованием конструкции микроРНК, предназначенной для ослабления нескольких IBP.У этих генно-инженерных нокдаун-линий было на 13-22% больше повреждений мембран, чем у растений дикого типа после замораживания до -10°C. Две линии нокдауна также продемонстрировали значительно более низкую выживаемость всего растения при замораживании при -8°C по сравнению с травой дикого типа (Bredow et al., 2016b). Эти эксперименты однозначно подтвердили важность IBP в выживании растений при замораживании.

    IBPs как антипатогенные белки

    Большое количество генов IBP растений обнаруживают гомологию последовательностей с генами PR (таблица 1).Из шести IBP в озимой ржи, Secale злаковых , две были идентифицированы как β-1,3-эндоглюканазы, две как эндохитиназы класса I и класса II и две как тауматин-подобные белки, температурная защита (Hon et al., 1995). Эти белки обладают как связывающей лед, так и гидролитической активностью (Yeh et al., 2000). Это представляет интересный эволюционный контекст для роли IBPs как белков с двойной функцией, обеспечивающих защиту как от замораживания, так и от атаки патогенов.Действительно, IBP с гомологией последовательностям гена хитиназы были идентифицированы у костра ( Bromus inermis) , вязолистного ( Chimonanthus praecox ) и ели ( Picea abies и P. peungens ) (Nakamura et 08 al., 20 al., 20 al., 20 al., 20 al., 208 al., 2025) и ели ( Picea abies и P. peungens ). ; Джарзабек и др., 2009; Чжан и др., 2011). Тауматин-подобный белок также был обнаружен в озимой пшенице Triticum aestivum (Kontogiorgos et al., 2007). Примечательно, что, за исключением IBP из озимой ржи, гидролитическая активность этих белков практически не тестировалась.

    Другие белки, в том числе белки моркови, Daucus carota (Meyer et al., 1999), и облепихи, Hippophae rhamnoides (Gupta and Deswal, 2012), имеют сходную последовательность с белками-ингибиторами полигалактуроназы (PGIP). , хотя они могут больше не обладать активностью PGIP, как это было показано для IBP моркови, Dc AFP (Zhang et al., 2006). Кроме того, морозоустойчивые травы из подсемейства Pooideae имеют некоторую гомологию последовательностей с богатыми лейцином повторами (LRR) фитосульфокиновыми рецепторными тирозинкиназами (PS-RTK), участвующими в распознавании связанных с патогенами молекулярных паттернов (Sandve et al., 2008). Однако карбоксиконцевые киназные домены этих белков были заменены мотивами связывания льда, а аминоконцевой домен LRR не имеет близкой консервативности с рисом, Oryza sativa , PS-RTK, предположительно, геном происхождения. Таким образом, неясно, играют ли эти белки роль в восприятии патогенов растений.

    Белки, связывающиеся со льдом, играют дополнительную роль в борьбе с патогенами, ингибируя активность зародышеобразования льда (INA). Некоторые бактерии способствуют росту кристаллов льда как способу их распространения (Wu et al., 2009), однако вполне вероятно, что эпифиты использовали это свойство, чтобы получить доступ к внутриклеточным хранилищам питательных веществ (Lindow et al., 1982). Белки зародышеобразования льда (INP) были идентифицированы у грамотрицательных бактерий, включая Pseudomonas syringae, P. viridiflava, P. fluescences, P. Borealis, Xanthomonas campestries, Erwinia ananas, Er. уредовра и Эр. herbicola (Warren and Corotto, 1989; Hirano and Upper, 1995; Wu et al., 2009). Такие активные льдообразующие (INA+) бактерии были выделены из листьев многих видов сельскохозяйственных культур и, несомненно, приводят к потерям урожая на миллионы долларов каждый год (Hill et al., 2014). Было показано, что IBP растений снижает температуру зародышеобразования и скорость распространения льда, образующегося в присутствии P. syringae (Griffith et al., 2005). Более того, IBP из райграса пастбищного ( Lp AFP) и близкородственного костра пурпурного, B. distachyon ( Bd IRI), снижали температуру зародышеобразования растворов, содержащих экстракты P. syringae , примерно на 1,9 °C и ~2,3°C соответственно (Tomalty and Walker, 2014; Bredow et al., 2017). Учитывая низкую ТГ-активность этих белков (~0,3°C и ~0,1°C в используемых концентрациях), понижение точки замерзания не может объяснить ингибирование INA бактериального происхождения. Хотя IBP локализованы совместно с INP на бактериальной поверхности, эти эксперименты пока только предполагают, что IBP взаимодействуют непосредственно с INP, тем самым предотвращая рост льда на поверхности INP.

    Белки, связывающие лед: механизмы действия и наблюдения

    Адсорбция и формирование кристаллов льда

    Активность IBP обусловлена ​​их способностью адсорбироваться на льду, процесс, который можно визуализировать, наблюдая за «формированием» льда в присутствии IBP.Водные или стандартные буферы замерзают в виде круглых дисков, которые быстро расширяются из плоскости призмы при температурах, близких к точке замерзания (Nada and Furukawa, 2005). Напротив, адсорбция IBP на одной или нескольких ледяных поверхностях (рис. 2А) приводит к морфологии льда, свидетельствующей об их специфичности ледяной поверхности. Эти морфологии можно легко изучить под микроскопом (~ 40 X) на охлаждаемом предметном столике (рис. 2B).

    РИСУНОК 2. (A) Плоскости кристаллов льда, адсорбированные IBP.IBP растений продемонстрировали сродство к первичным и вторичным плоскостям призмы, а также к базальным плоскостям. Пока еще не идентифицированы IBP растений, обладающие сродством к пирамидальной плоскости. Lp AFP, например, связывает как первичную призму, так и базисные плоскости. (B) Морфология кристаллов льда в отсутствие (a) и в присутствии IBP из двух трав ( b–h ). Lolium perenne Lp AFP (1 мг/мл) кристаллы льда с осью а, обращенной к считывающему устройству, показаны на B , а с осью с к считывающему устройству на c .Формирование в присутствии низких концентраций IBP из Brachypodium distachyon (0,01 мг/мл) показано на d . Панели ( e–h ) показывают взрыв кристалла льда при превышении равновесной точки замерзания. (C) Рост кристаллов льда после 24-часового периода отжига при -6°C, демонстрирующий ингибирование рекристаллизации льда (IRI) IBP. Буфер без IBP (–IBP) содержит 100 мМ Tris-HCl и 50 мМ NaCl. Образцы с L. perenne IBP ( Lp AFP) (+IBP) разводили до 0.5 мг/мл в том же буфере.

    Умеренно активные IBP превращают лед в острые бипирамидальные кристаллы, адсорбируясь на плоскостях призмы (Бар-Долев и др., 2012). По достижении точки замерзания эти кристаллы быстро «вырываются» из осей с, образуя игольчатые структуры. Гиперактивные IBP, с другой стороны, способны адсорбироваться более чем на одной плоскости льда, что приводит к образованию гексагональных бипирамидальных или «лимонных» кристаллов льда. В отличие от умеренно активных IBP, кристаллы льда лопаются с более мягкой морфологией, нормальной к оси с, что указывает на сродство к базальной плоскости в дополнение к адсорбции вдоль плоскостей призмы или пирамиды.Предполагается, что эта «защита» базальной плоскости, по крайней мере, частично ответственна за более высокую активность этих белков, поскольку рост кристаллов льда происходит быстрее вдоль оси с. Несколько неожиданно IBP растений с низким TH, такие как Lp AFP, имеют прямую морфологию кристаллов льда и характер взрывов, более близкие к наблюдаемым при гиперактивных IBP (рис. 2B). Эти кристаллы льда имеют форму гексагональных бипирамид, которые вместо этого разрываются от осей а, что приводит к расширению базальных плоскостей, что явно указывает на высокую близость к этому участку.При низких концентрациях белка IBP с низким TH принимают мягкую шестиугольную форму (рис. 2B), как видно из клеточных экстрактов акклиматизированных к холоду растений. Эта форма льда согласуется со всеми IBP растений, идентифицированными на сегодняшний день, с некоторыми незначительными различиями в наблюдаемых моделях взрывов, например, наблюдаемых с IBP местной озимой ржи и костреца пурпурного, которые разрываются от кончиков плоскости призмы, что приводит к цветкообразным кристаллы (Yaish et al., 2006; Bredow et al., 2016b). Всплески в форме цветков также наблюдались с некоторыми другими растительными экстрактами, включая Lp AFP местного производства.

    Термический гистерезис и ингибирование рекристаллизации льда

    В отсутствие растворенных веществ и других модификаторов температуры плавления и замерзания растворов находятся в равновесии. В отличие от растворенных веществ, которые снижают температуру замерзания ниже равновесного коллигативным образом, IBP могут оказывать большее влияние на температуру замерзания даже при микромолярных концентрациях (Olijve et al., 2016). Для описания этого явления использовалась модель адсорбции-ингибирования, согласно которой необратимая адсорбция IBP на поверхности льда через определенные промежутки времени ограничивает область, где молекулы воды могут присоединиться к кристаллической решетке льда, точками между соседними IBP (Raymond and DeVries, 1977). ).Это, в свою очередь, вызывает искривление, энергетически невыгодное для роста кристаллов льда. Поскольку кристалл льда не может расти дальше при этой температуре, жидкость, окружающая лед, остается в переохлажденном состоянии, что приводит к понижению температуры замерзания. При понижении температуры граница раздела лед-вода преодолевает энергетический барьер, создаваемый минимальной кривизной поверхности кристаллов льда, и начинается рост. Кривизну поверхности кристаллов льда визуализировать невозможно, однако температуру, при которой одиночный кристалл льда тает и растет в присутствии IBP, можно точно определить с помощью нанолитрового осмометра или эквивалентного устройства (Middleton et al., 2014).

    Как описано в эффекте созревания Оствальда, рекристаллизация льда происходит потому, что рост крупных кристаллов льда за счет более мелких является термодинамически благоприятной реакцией (Knight and Duman, 1986). Это свойство можно проверить путем мгновенного замораживания раствора при однородных температурах зародышеобразования, чтобы создать поле из крошечных кристаллов льда, и последующего отжига при температурах, близких к температуре плавления (Middleton et al., 2014; рисунок 2C). Считается, что, подобно активности TH, IRI происходит за счет предотвращения добавления молекул воды из квазижидкого слоя в кристаллическую решетку льда.Однако IBP, вероятно, также «прикрепляют» поверхности кристаллов льда и, как таковые, препятствуют таянию.

    Термический гистерезис и IRI являются отдельными свойствами с небольшой корреляцией между показателями высокого IRI и высокой активности TH, как показано на примере АФП растений, которые демонстрируют высокий IRI и низкий TH. Однако механизмы, которые отличают эти свойства, связанные со льдом, в настоящее время неясны. Стоит отметить, что в отличие от ТГ, для которой требуется относительно высокая концентрация IBP, IRI возникает при субмикромолярных концентрациях (Yu et al., 2010), предполагая, что устойчивые к заморозкам растения могут не требовать высоких титров IBP, необходимых для чувствительных к заморозкам организмов.

    Принципы связывания льдом

    Механизм, лежащий в основе адсорбции IBP на льду, обсуждался десятилетиями. Ранние данные свидетельствуют о том, что гидроксильные группы на поверхности IBP могут генерировать водородные связи между белком и кристаллической решеткой льда (Knight et al., 1993). Позже была выдвинута гипотеза, что гидрофобность поверхностей IBP может способствовать адсорбции за счет энтропийной реакции, способствующей связыванию льда над поверхностью, подверженной воздействию растворителя (Sönnichsen et al., 1996). В настоящее время гипотеза закрепленных клатратных вод является наиболее принятой моделью адсорбции кристаллов льда (Garnham et al., 2011). Эта модель предполагает, что сама структура IBP отвечает за организацию окружающих молекул воды в подобную льду решетку путем формирования водяных клеток вокруг метильных групп обращенных наружу остатков на связывающей лед поверхности. Эта модель согласуется со способностью IBP также адсорбироваться на газовых гидратах (Sun et al., 2015; Walker et al., 2015).Формируя структуры, напоминающие квазижидкий слой, существующий между водой и льдом, IBP затем могут сливаться с поверхностями кристаллов льда. В этой модели белок в конечном итоге «замерзнет» на поверхности после слияния, что приведет к необратимой адсорбции.

    Экспериментально было установлено, что IBP адсорбируются на льду, используя плоскую поверхность, способную образовывать водяные клетки, известную как связывающая лед «поверхность» или «лицо» (IBF). Свойства IBF определяют, как будут организованы молекулы воды и, следовательно, какая плоскость льда будет связана.Эта гипотеза связывания была значительно подтверждена кристаллографией белков, которая показала прочно связанные молекулы воды на предложенных IBF кристаллизованных IBP бактерий и рыб ( Mp AFP и Maxi). Эти структуры подтверждают утверждение о том, что IBF организуют поверхностные воды с идеальной комплементарностью плоскости первичной призмы (Garnham et al., 2011; Sun et al., 2014). Поскольку многие IBP кристаллизуются в виде димеров вдоль их IBF, такой анализ невозможен для многих из них, включая Lp AFP.

    Структурные модели заводских IBP

    Как уже отмечалось, было охарактеризовано несколько десятков IBP растений. Из 15 секвенированных (Таблица 1) кристаллическая структура была получена только для Lp AFP, хотя частичные молекулярно-динамические модели были предложены для Dc AFP и Bd IRI (Zhang et al., 2006; Бредоу и др., 2017). Поскольку IBP, по-видимому, развивались независимо, согласованной последовательности для IBP нет, хотя некоторые авторы стремились вывести алгоритмы поиска (например,г., Ю и Лу, 2011). В целом было установлено, что IBF в основном плоские, часто с повторяющимися остатками, несущими короткие, относительно гидрофобные R-группы по сравнению с не-IBF, которые часто содержат заряженные остатки, открытые для растворителя (Davies and Hew, 1990; Garnham et al., 2011). Повторяющийся характер многих IBP может способствовать организации вод в ледоподобную решетку (Tyshenko et al., 1997; Garnham et al., 2008; Middleton et al., 2009; Zhuang et al., 2012). IBF, идентифицированные в нескольких известных IBP с низким TH, таких как Lp AFP и Bd IRI, хотя также плоские и повторяющиеся, по-видимому, имеют менее регулярные IBF с большим количеством замен, казалось бы, менее идеальными остатками, чем наблюдаемые с гиперактивными IBP. , что, возможно, объясняет их более низкую активность ТГ.

    Хотя, как указано, кристаллические структуры IBP растений неизвестны, за исключением усеченного рекомбинантного Lp AFP, моделирование предполагает, что IBP из разрозненных растений могут образовывать бета-сэндвичи, альфа-спиральные складки и глобулярные структуры (рис. 3). . Lp AFP имеет правостороннюю бета-спираль с 7 петлями, состоящую из 14–15 остатков на виток с повторяющимся мотивом связывания льда NXVXG/NXVXXG, где X представляет собой остаток, подвергающийся воздействию растворителя (Middleton et al., 2012). . В целом, Lp AFP является довольно гидрофильным по сравнению с другими IBP, с большим количеством обращенных наружу остатков, которые взаимодействуют со льдом, включая треонин, серин и валин (Middleton et al., 2009). Белковое ядро ​​стабилизировано двумя рядами гидрофобных остатков аспарагина. Структурное моделирование первоначально предложило две предполагаемые IBF с относительно плоскими поверхностями (Kuiper et al., 2001), однако кристаллография белков показала, что одна из этих граней была менее плоской. Сайт-направленный мутагенез подтвердил, что только более плоское «а-лицо» участвует в связывании льда (Middleton et al., 2009). Напротив, обе эти грани, по-видимому, связывали лед у близкородственного IBP Bd IRI, однако более плоская «а-грань» оказалась наиболее необходимой (Bredow et al., 2017).

    РИСУНОК 3. Модели Plant IBP, созданные путем запуска последовательностей GenBank через сервер Phyre 2.0 (http://www.sbg.bio.ic.ac.uk/phyre2/html/page.cgi?id=index). Показана кристаллическая структура домена IBP Lolium perenne, Lp AFP (GenBank ID: AJ277399.1 ) (A) и модели для: Daucus carota Dc AFP ( AF055480.1 AF055480.1 ) . (B) , WRKY-IBP (STHP) ( AAL268542.1 ) (слева) и эндохитиназа I типа ( Q84LQ7 ) (справа) из Solanum dulcamara (C) , Triticum aestivum тауматин-подобный IBP ( AAM15877.1 ) (D) , глюканаза-IBP ( CAJ58506.1 ) (слева) и эндохитиназа-IBP типа II (справа) ( AF280438.1 ) из Secale злаков e (E ) и IBP от Chorella vulgaris ( ABR01234.1 ) (F) .

    Рекомбинантный Lp AFP является частичным белком, но соответствующий ген, по-видимому, кодирует как амино-концевой домен LRR, так и карбокси-концевой домен, связывающий лед (Sidebottom et al., 2000). Для полноразмерного белка не было получено кристаллической структуры, но, учитывая, что активность IBP обеспечивается только доменом, связывающим карбоксильный лед, в экстрактах апопласта L. perenne , было высказано предположение, что произошел гидролиз (Sandve et al., 2008). Нуклеотидные последовательности IBP из B. distachyon имеют сходную двудольную структуру с Lp AFP (Bredow et al., 2016b). Было показано, что полноразмерные рекомбинантные конструкции LRR-IBP обладают активностью IBP. Однако только связывающий лед домен двух IBP, Bd IRI3 и Bd IRI4, был идентифицирован в апопласте акклиматизированных к холоду растений с помощью масс-спектрометрии, что еще больше подтверждает гипотезу о том, что IBP гидролизуются in planta.

    Положение о МБП

    Сотовая локализация

    Учитывая, что нуклеация льда обычно происходит вне клеток, неудивительно, что большинство IBP были выделены из экстрактов апопласта. Предполагается, что почти все IBP растений либо экспортируются на основании идентификации предполагаемых амино-концевых сигнальных последовательностей, либо имеют подтвержденную апопластическую локализацию (рис. 1B; Griffith et al., 1992; Hon et al., 1994; Antikainen et al., 1996; Бредоу и др., 2017).Однако двойная функциональная активность некоторых IBP предполагает возможную роль внутриклеточной локализации. Например, IBP из плакучей форзиции ( Fs AFP; Forsythia suspensa ), которая разделяет гомологию с дегидринами, сохраняется в цитоплазме (Simpson et al., 2005). Кроме того, S. dulcamara продуцирует IBP, в котором отсутствует амино-концевой сигнальный пептид и который имеет гомологию с транскрипционным фактором WRKY, который участвует в регуляции транскрипции генов PR (STHP-64; Huang and Duman, 2002).Это говорит о том, что некоторые IBP растений могут также действовать внутриклеточно, чтобы ингибировать клеточную дегидратацию или регулировать экспрессию генов, в то же время служа для предотвращения внутриклеточной нуклеации льда.

    Несмотря на несколько исключений, большинство IBP содержат амино-концевые сигнальные пептиды, которые направляют секрецию в апопласт через путь Гольджи-эндоплазматический ретикулум (ER) (рис. 1В). Очевидным исключением является IBP из L. perenne, Lp IRI2, который не имеет последовательности выше домена, связывающего лед (Sandve et al., 2008). Любопытно, что, несмотря на отсутствие какого-либо узнаваемого сигнального пептида, трансгенные исследования A. thaliana показали, что эта изоформа, тем не менее, локализована в апопласте (Bredow et al., 2016a). Хотя специфический механизм неизвестен, у растений сообщалось о нетрадиционных путях секреции, таких как прямые транслокационные каналы, рециркуляция эндосом или мембранные пузыри (Cheng and Williamson, 2010). Предполагается, что пути секреции, отличные от Гольджи, ответственны за примерно 60% A.thaliana , состоящий в основном из связанных со стрессом белков, которые по большей части остаются неидентифицированными (Regente et al., 2012). Вполне возможно, что некоторые неклассические пути секреции могут обеспечивать более быструю секрецию белков и обеспечивать избирательное преимущество в стрессовых условиях (Keller et al., 2008; Bredow et al., 2016a).

    Утверждается, что внутриклеточная локализация IBPs может быть выгодной. Однако экспрессия in planta частичного IBP ( Lp AFP), лишенного сигнального пептида и сохраняющегося в цитоплазме трансгенных растений, обеспечивала значительно меньшую защиту от замораживания по сравнению с апопластически локализованными Lp IRI2 и Lp IRI3. (Бредоу и др., 2016а). Это несоответствие нельзя объяснить разной активностью связывания льда, поскольку анализа in vitro с соответствующими рекомбинантными белками были сопоставимы. Таким образом, наблюдение поразительных различий в трансгенной защите в зависимости от выраженного IBP свидетельствует о том, что растениям предоставляется значительная защита от мороза только тогда, когда они локализованы в апопласте. Предположительно защита обеспечивается за счет предотвращения роста крупных повреждающих кристаллов льда, которые могут разорвать плазматические мембраны.Несмотря на редкость, внутриклеточный лед может привести к непоправимому повреждению клеток (Steponkus, 1984; Guy, 1990; Pearce and Ashworth, 1992; Wisniewski et al., 1997). Таким образом, производство любых эндогенных внутриклеточных IBP, вероятно, будет невыгодным. Хотя возможно, что внутриклеточные IBP растений теоретически могут обеспечивать защиту за счет стабилизации мембраны или оппортунистически за счет высвобождения IBP после лизиса клеток и последующей защиты соседних клеток, такие механизмы не были экспериментально продемонстрированы.

    Пространственно-временная регуляция

    IBP растений не экспрессируются конститутивно, а скорее индуцируются в ответ на различные стимулы. Холодовая акклиматизация является неизменным регулятором экспрессии IBP у растений, однако существует вариабельность времени, необходимого при низкой температуре для максимальной экспрессии IBP. Например, транскрипты IBP из L. perenne накапливаются всего за 1 час воздействия с максимальной экспрессией через 7 дней (Zhang et al., 2009). Точно так же транскрипты Dc AFP накапливаются всего за 30 минут при 4°C (Meyer et al., 1999). IBP из одного и того же растения также могут регулироваться по-разному, на что указывает наблюдение, что транскрипты глюканазы-IBP озимой ржи в изобилии появляются через 24 часа при 5°C, в то время как для полной индукции хитиназы-IBP из того же растения требуется 3–7 недель (Hon et al. и др., 1995; Йех и др., 2000). Характер обработки холодом также влияет на индукцию IBP, о чем свидетельствует индукция IBP озимой пшеницы ( T. aestivum ) Ta IRI1 и Ta IRI2 как холодовым шоком, так и постепенным снижением температуры, тогда как хитиназа-, глюканаза — и тауматин-подобные транскрипты IBP индуцировались только последним режимом (Winfield et al., 2010).

    В полевых условиях акклиматизация к холоду связана как с низкими температурами, так и с коротким световым периодом. Это наблюдалось для IBP озимой ржи, которые накапливаются быстрее при коротких циклах дня (8-часовой свет), которые больше напоминают осенние условия, чем при длинном дне (16-часовой свет) (Marentes et al., 1993). Возможно, обороту IBP могут способствовать изменения температуры, как это наблюдается в случае индуцированных холодом хитиназных IBP, которые разлагаются через 12 часов после воздействия 20°C, или Bd IRI, которые инактивируются при температуре выше 4°C (Hon et al. ., 1995; Бредоу и др., 2017). Lp AFP денатурирует при температуре >25°C, но может рефолдироваться при возвращении к низким температурам, по крайней мере, in vitro (Sidebottom et al., 2000). Хотя эти наблюдения предполагают изменения в титрах белков, многие IBP растений могут не подвергаться быстрой смене циркадных циклов, как предполагают IBP озимой пшеницы, облепихи и тибетской травы Rhodiola algida , все из которых относительно термостабильны (Lu et al. al., 2000; Gupta and Deswal, 2012; Kontogiorgos et al., 2007).

    Некоторые IBP индуцируются другими абиотическими стрессами, гормонами или биотическими стимулами. Например, при отсутствии холодовой акклиматизации ИБП озимой ржи накапливаются после обработки этиленобразующим соединением этефоном (Yu et al., 2001). Эти же IBP могут быть вызваны различными стрессовыми воздействиями, включая салициловую кислоту (SA), абсцизовую кислоту (ABA), воздействие патогенов и засуху (Yu and Griffith, 2001; Yu et al., 2001). В то время как «IBP», индуцированные SA или ABA, не обладают активностью связывания льда, и поэтому их назначение неясно, как засуха, так и обработка этиленом связаны с присутствием IBP, которые эффективно адсорбируются на льду.Кроме того, IBP, секретируемые в клетках суспензии R. algida после индукции ABA, также проявляли активность связывания льда (Lu et al., 2000). Это исследование дает интересный контекст для белков с двойной функцией, предполагая, что природа индуцирующих стимулов может влиять на их активность, связанную со льдом. Присутствие ферментных субстратов или клеточного нацеливания может способствовать участию в дифференциальных функциях. Однако также была выдвинута гипотеза, что несколько ролей одного и того же IBP можно объяснить альтернативным сворачиванием белков или посттрансляционными модификациями (Yaish et al., 2006; Гупта и Десваль, 2014b).

    Стадия развития растений также может быть важна для индукции IBP (Griffith and Yaish, 2004). IBP в тканях листа акклиматизированной к холоду озимой ржи показывают более высокие уровни, когда растения развивались в условиях акклиматизации к холоду, в отличие от растений, которые были полностью развиты до воздействия низких температур (Hon et al., 1995; Yeh et al., 2000). Кроме того, не все IBP выражены согласованно; у озимой ржи IBP глюканазы индуцируются раньше, чем тауматин-подобные IBP, тогда как хитиназные IBP экспрессируются значительно позже.Хотя этот профиль может указывать на то, что некоторые IBP требуют разных периодов воздействия низких температур, поскольку хитиназные IBP накапливаются только в тканях, которые развиваются при температурах акклиматизации, а не в растениях, впоследствии перенесенных на холод, компонент развития более вероятен (Yeh et al., 2000). ). Хотя сообщалось, что семена избегают замерзания с помощью полиолов и сахаров, однолетний сорт костреца пурпурного обладает активностью связывания льда в семенах, предположительно Bd IRI (Bredow, 2017).Возможно, еще более любопытным является наличие зависящей от холодовой акклиматизации активности связывания льда в стареющих тканях, таких как листья на однолетних побегах золотарника Solidago canadensis , которые зимуют в виде корневища (Tomalty, 2016). Ясно, что необходимы дополнительные исследования для определения присутствия и возможных функций IBP на различных стадиях развития.

    Белки, связывающиеся со льдом, из разных растений-хозяев также обнаруживают отличительные тканеспецифические паттерны экспрессии. Например, хитиназные IBP озимой ржи локализованы в клетках паренхиматозного влагалища, мезофилла, эпидермы и флоэмы листьев, в то время как в корнях активность не обнаружена (Pihakaski-Maunsbach et al., 1996). Эта отчетливая локализация контрастирует с Dc AFP, который в равной степени накапливается в листьях, стеблях и корнях после акклиматизации к холоду (Smallwood et al., 1999). Даже различные изоформы могут регулироваться независимо, как показано на повсеместно распространенной озимой пшенице Ta IRI-1 по сравнению со специфичной для листьев экспрессией Ta IRI-2 того же растения (Tremblay et al., 2005). Дифференциальная экспрессия изоформ также вероятна у B. distachyon , при этом две из 7 изоформ идентифицированы в 2-дневных листьях, акклиматизированных к холоду (Bredow et al., 2016б).

    Посттрансляционная модификация

    Как следует из их названия, большая часть связывающей лед активности, идентифицированной у растений, связана с белками, некоторые из которых считаются гликозилированными (рис. 1В). Гликозилированные IBP были идентифицированы у различных растений, включая L. perenne, S. dulcamara, D. carota , монгольский Menkhargana ( Ammopiptanthus mongolicus ) и H. rhamnoides (Duman, 1994; Smallwood et al., 1999). ; Сайдботтом и др., 2000; Фей и др., 2008 г.; Гупта и Десвал, 2012). В некоторых случаях гликозилирование необходимо для активности связывания льда, например, для IBP, продуцируемых у S. dulcamara (Duman, 1994), в то время как для других растений такие модификации не требуются. Например, Lp AFP, полученный рекомбинантно в E. coli и, таким образом, не имеющий посттрансляционных модификаций, все еще сохраняет способности IRI, TH и формирования льда (Pudney et al., 2003). То же самое верно для D. carota и H.rhamnoides (Smallwood et al., 1999; Gupta and Deswal, 2014a).

    Первоначально была выдвинута гипотеза, что посттрансляционная модификация может играть роль в регуляции IBP с двойной функцией, особенно тех, которые обладают связывающей лед и гидролитической активностью (Yaish et al., 2006). Например, сообщалось о гидроксилировании хитиназы-IBP озимой ржи, но, по-видимому, это не влияет на связывание льда (Sticher et al., 1992; Hon et al., 1995; Yeh et al., 2000). Более поздние данные свидетельствуют о конформационных изменениях в различных активностях IBP, как это видно с хитиназой-IBP из H.rhamnoides , которые, по-видимому, обнаруживают Ca 2+ -зависимую рефолдинг (Gupta and Deswal, 2014a). Однако IBP хитиназы класса I костра, B. inermis , не подвержены влиянию Ca 2+ (Nakamura et al., 2008), а IBP озимой ржи ингибируются высокими концентрациями Ca 2+ (Stressmann et al. др., 2004). Подобно многим другим регуляторным факторам, участвующим в активности IBP, роль Ca 2+ до сих пор не ясна, хотя этот ион действительно играет роль в соответствующем фолдинге бактериальной IBP из соленых озер ( Mp AFP; Guo et al. др., 2012).

    Перспективы использования ИБФ для трансгенных культур

    Значительные усилия были предприняты для создания растений с повышенной устойчивостью к заморозкам, в основном с помощью традиционных методов селекции, а также путем изучения трансгенных растений. Последний подход имел заметно ограниченный успех. Эти усилия важны, поскольку изменения атмосферной циркуляции и изменения климата влияют на сроки безморозных периодов весной и осенью, что приводит к непредсказуемости (Strong and McCabe, 2017).В частности, изменение климата, по-видимому, является причиной изменения сроков наступления осенних заморозков, что вызывает у производителей неуверенность в отношении управления посевами. Теоретически экспрессия IBP должна обеспечивать защиту от замерзания чувствительных культур, подверженных сезонным отрицательным температурам. Такие подходы наиболее применимы к растениям, не обладающим внутренней способностью к акклиматизации к холоду, например к некоторым однолетним садовым растениям или нежным декоративным растениям для срезки цветов, а также к культурам с ограниченным потенциалом морозоустойчивости, таким как некоторые мягкие фрукты.Контролируемая экспрессия трансгенных IBP может уменьшить дегидратацию клеток и повреждение мембран, вызванное замораживанием. В качестве альтернативы, в ситуациях, когда температура быстро падает ниже нуля, без необходимых периодов адаптации к холоду, что может иметь место в климате прерий, конститутивная экспрессия IBP может ограничивать почти летальное повреждение тканей и может быть привлекательным для цветочной индустрии, которая может быть менее связаны с генетическими модификациями.

    Были предприняты попытки использовать IBP, обнаруженные в различных организмах-хозяевах, для обеспечения защиты от замерзания (таблица 2).Первоначальные усилия были сосредоточены на экспрессии IBP рыб с умеренными уровнями активности TH в табаке (Nicotiana tobacum ) и томате ( S. lycopersicum ) (Hightower et al., 1991; Kenward et al., 1999). Хотя TH и IRI наблюдались в экстрактах тканей, при тестировании растений на устойчивость к замораживанию они показали небольшую морозостойкость и снизили летальную температуру только на 1°C (Wallis et al., 1997; Worrall et al., 1998; Kenward et al., 1999; Khanna and Daggard, 2006).Ожидалось, что использование гиперактивных IBPs еловой листовертки и огневки в табаке и A. thaliana значительно снизит точку замерзания и, таким образом, предотвратит замерзание. Хотя эти эксперименты показали, что IBP накапливаются и проявляют активность как TH, так и IRI, повышенной выживаемости при замораживании не наблюдалось (Holmberg et al., 2001; Huang et al., 2002). Вероятно, из-за их низкой активности TH о попытках экспрессии IBP трансгенных растений в чувствительных к замораживанию растениях-хозяевах сообщалось только позже.Примечательно, что даже на сегодняшний день только в трех исследованиях использовались IBP растений, полученные из моркови и райграса пастбищного, для создания трансгенных растений. Во всех случаях трансгенные растения продемонстрировали снижение утечки электролита, что указывает на защиту мембраны, и повышенную выживаемость при замораживании при температурах ниже –5°C в зависимости от последовательности и хозяина (Fan et al., 2002; Zhang et al., 2010; Bredow). и др., 2016а).

    ТАБЛИЦА 2. Трансгенные растения, экспрессирующие белки, связывающие лед, и антифризные белки (АФП).

    Эти успешные эксперименты предполагают, что IBP, которые произошли от морозоустойчивых организмов, могут лучше подходить для переноса на другие растения и создания трансгенных культур. Это может быть правдой по ряду причин. Как упоминалось ранее, лед, образующийся в присутствии умеренно активных IBP, может образовывать острые бипиримидальные кристаллы льда, которые приводят к образованию игольчатых осколков льда при их разрыве, предположительно вызывая значительное повреждение клеток. Также вероятно, что если точки замерзания значительно понизятся при использовании AFP с высоким TH, взрывной рост кристаллов льда может привести к опасному внутриклеточному замораживанию.Интересно, что IBP антарктической микроводоросли Chloromonas sp. , недавно был идентифицирован, который имеет удивительно сходные свойства со свойствами, наблюдаемыми у IBP растений, с низким TH (~ 0,4 ° C при 5 мг / мл) и гексагональной формой льда (Jung et al., 2016). Мы предполагаем, что IBP из видов водорослей, таких как описанные выше, также могут быть хорошими кандидатами для трансгенных. Дополнительным преимуществом IBP растений для улучшения урожая является их способность подавлять образование кристаллов льда, связанное с патогенными эпифитами, свойство, которое не наблюдалось для IBP нерастительного происхождения (Tomalty and Walker, 2014; Bredow et al., 2017).

    Недавно было продемонстрировано, что экспрессия более чем одной изоформы IBP, которая должна экспрессироваться эндогенно в растениях, дополнительно увеличивает выживаемость при замораживании трансгенных A. thaliana (Bredow et al., 2016a). Таким образом, IBP могут работать совместно, чтобы оптимально ограничить рост кристаллов льда, предпочтительно адсорбируясь на разных плоскостях кристаллов льда или посредством какого-либо другого неизвестного механизма. В сочетании с наблюдением, что локализация белка диктует уровень защиты растений от замерзания, становится ясно, что необходимы дальнейшие исследования, касающиеся регуляции IBPs в растениях, прежде чем такие трансгенные продукты смогут иметь практическую сельскохозяйственную ценность.Отсутствие морозоустойчивого модельного организма для изучения функции IBP было одним из самых больших ограничений этого исследования. Однако недавняя идентификация и характеристика семейства IBP растений, которые необходимы для защиты от замерзания (Bredow et al., 2016b), указывает на то, что модельная трава B. distachyon и другие многолетние виды Brachypodium будет ценным инструментом для изучения IBP растений в будущем. Перспектива того, что эти необычные белки могут не только способствовать будущей продовольственной безопасности, но и способствовать развитию декоративной цветочной индустрии, делает эти усилия стоящими.

    Вклад авторов

    MB написал эту рукопись с исправлениями и советами редакции от VW.

    Финансирование

    Финансовая поддержка была оказана VW в рамках гранта NSERC (Канада) Discovery.

    Заявление о конфликте интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Подтверждение

    Мы принимаем к сведению комментарии, сделанные по более раннему черновику Dr.Дж. Б. Чаррон.

    Ссылки

    Абейнаяке, С.В., Эцеродт, Т.П., Йонавичиенц, К., Бирн, С., Асп, Т., и Болт, Б. (2015). Метаболизм фруктана и изменения состава фруктана при холодовой акклиматизации райграса пастбищного. Фронт. Растениевод. 6:329. doi: 10.3389/fpls.2015.00329

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Antikainen, M., Griffith, M., Zhang, J., Hon, W.C., Yang, D.S.C., and Pihakaski-Maunsbach, K. (1996).Иммунолокализация белков-антифризов в листьях, кроне и корнях озимой ржи методом тканевой печати. Завод физиол. 110, 845–857. doi: 10.1104/стр.110.3.845

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Арни, Д.К., Линдоу, С.Е., и Аппер, К.Д. (1976). Чувствительность к морозу Zea mays повысилась при применении Pseudomonas syringae . Природа 262, 282–284. дои: 10.1038/262282a0

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Эшворт, Э.Н. и Кифт, Т.Л. (1995). «Активность зародышеобразования льда, связанная с растениями и грибами», в Biological Ice Nucleation and its Applications , Vol. 8, ред. Р. Э. Ли, Г. Дж. Уоррен и Л. В. Густа (Сент-Пол, Миннесота: APS Press), 137–162.

    Академия Google

    Бар-Долев М., Челик Ю., Веттлауфер Дж. С., Дэвис П. Л. и Браславский И. (2012). Новое понимание роста и таяния льда под действием белков-антифризов. JR Soc. Интерфейс 9, 3249–3259.doi: 10.1098/rsif.2012.0388

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Бредов, М. (2017). Характеристика и нокдаун семейства льдосвязывающих белков из морозоустойчивых трав. к.т.н. диссертация, Королевский университет, Канада, ON.

    Академия Google

    Бредоу, М., Томалти, Х., Смит, Л., и Уокер, В. К. (2017). Ледяная и антиядерная активность связывающего лед белка из однолетней травы, Brachypodium distachyon . Окружающая среда растительных клеток. doi: 10.1111/pce.12889 [Epub перед печатью].

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Бредоу М., Вандербельд Б. и Уокер В. К. (2016a). Белки, связывающие лед, придают устойчивость к замораживанию трансгенным Arabidopsis thaliana . Завод Биотехнолог. Дж. 15, 68–81. doi: 10.1111/pbi.12592

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Бредов М., Вандербельд Б. и Уокер В.К. (2016б). Нокдаун связывающих лед белков в Brachypodium distachyon демонстрирует их роль в защите от замерзания. PLOS ONE 11:e0167941. doi: 10.1371/journal.pone.0167941

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Цай, Ю., Лю, С., Ляо, X., Дин, Ю., Сунь, Дж., и Чжан, Д. (2011). Очистка и частичная характеристика белков-антифризов из листьев Ligustrum lucidum Ait. Пищевые биопрод. Обработать. 89, 98–102. doi: 10.1016/j.fbp.2010.04.002

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Кэнни, М.Дж. (1995). Апопластическая вода и движение растворенных веществ: новые правила для старого пространства. Анну. Преподобный завод биол. 46, 215–236. doi: 10.1146/annurev.pp.46.060195.001243

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Ченг, Ф., и Уильямсон, Дж. Д. (2010). Существует ли секреция белка без свинца в растениях? Сигнал завода. Поведение 5, 129–131. дои: 10.4161/псб.5.2.10304

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Дэвис, П.Л. (2014). Белки, связывающие лед: замечательное разнообразие структур для остановки и запуска роста льда. Тенденции биохим. науч. 39, 548–555. doi: 10.1016/j.tibs.2014.09.005

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Дэвис, П.Л., и Хью, К.Л. (1990). Биохимия антифризных белков рыб. FASEB J. 4, 2460–2468.

    Академия Google

    Де Вриз, А.Л., Комацу С.К. и Фини Р.Э. (1970). Химические и физические свойства понижающих температуру замерзания гликопротеинов антарктических рыб. Дж. Биол. хим. 245, 2901–2908.

    Академия Google

    Дин, Ю., Ли, Х., Чжан, X., Се, К., Гонг, З. и Ян, С. (2015). Киназа OST1 модулирует толерантность к замораживанию, повышая стабильность ICE1 у Arabidopsis . Дев. Ячейка 32, 278–289. doi: 10.1016/j.devcel.2014.12.023

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Думан, Дж.Г. (1994). Очистка и характеристика белка теплового гистерезиса из растения горько-сладкого паслена Solanum dulcamara . Биохим. Биофиз. Acta 1206, 129–135. дои: 10.1016/0167-4838(94)

      -7

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Думан, Дж. Г. (2015). Животные связывающие лед (антифризы) белки и гликолипиды: обзор с акцентом на физиологические функции. Дж. Экспл. биол. 218, 1846–1855 гг. дои: 10.1242/джеб.116905

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Думан, Дж. Г., и Паттерсон, Дж. Л. (1978). Роль белков термогистерезиса в низкотемпературной толерантности насекомых и пауков. Криобиология 15, 683–684. дои: 10.1016/0011-2240(78)

      -2

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Фан Ю., Лю Б., Ван Х., Ван С. и Ван Дж. (2002). Клонирование гена антифризного белка моркови и его влияние на устойчивость к холоду у трансгенных растений табака. Plant Cell Rep. 21, 296–301. doi: 10.1007/s00299-002-0495-3

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Fei, Y.B., Cao, P.X., Gao, S.Q., Wang, B., Wei, L.B., Zhao, J., et al. (2008). Очистка и структурный анализ антифризных белков из Ammopiptanthus mongolicus . Подготов. Биохим. Биотехнолог. 38, 172–183. дои: 10.1080/10826060701885126

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Фэй, Ю.Б., Вэй, Л.Б., и Гао, С.К. (2001). Выделение, очистка и характеристика вторичной структуры антифризного белка из Ammopiptanthus mongolicus . Чин. науч. Бык. 46, 495–498. дои: 10.1007/BF03187266

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Флетчер, Г.Л., Хью, К.Л., и Дэвис, П.Л. (2001). Белки-антифризы костистых рыб. Анну. Преподобный Физиол. 63, 359–390. doi: 10.1146/annurev.physiol.63.1.359

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Фучигами, Л.Х., Вайзер, С.Дж., и Эверт, Д.Р. (1971). Индукция холодовой акклиматизации у Cornus stolonifera Michx. Завод физиол. 47, 98–103. doi: 10.1104/стр.47.1.98

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Гарнем, К., Кэмпбелл, Р.Л., и Дэвис, П.Л. (2011). Заякоренные клатратные воды связывают антифризные белки со льдом. Проц. Натл. акад. науч. США 108, 7363–7367. doi: 10.1073/pnas.1100429108

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Гарнем, К.П., Гилберт, Дж. А., Хартман, С. П., Кэмпбелл, Р. Л., Лейбурн-Пэрри, Дж., и Дэвис, П. Л. (2008). Ca 2+ -зависимый бактериальный антифризный белковый домен имеет новую бета-спиральную складку, связывающую лед. Биохим. Дж. 411, 171–180. дои: 10.1042/BJ20071372

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Gaudet, D.A., Laroche, A., Frick, M., Huel, R., and Puchalski, B. (2003). Развитие растений влияет на индуцированную холодом экспрессию транскриптов, связанных с защитой растений, у озимой пшеницы. Физиол. Мол. Завод Патол. 62, 175–184. doi: 10.1016/S0885-5765(03)00025-0

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Гилберт, Дж. А., Хилл, П. Дж., Додд, С. Э. Р., и Лейбурн-Пэрри, Дж. (2004). Демонстрация активности антифризного белка у бактерий антарктических озер. Микробиология 150, 171–180. doi: 10.1099/мик.0.26610-0

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Гриффит, М., Ала, П., Ян, Д. С. К., Хон, В.C. и Моффатт, Б.А. (1992). Белок-антифриз вырабатывается эндогенно в листьях озимой ржи. Завод физиол. 100, 593–596. doi: 10.1104/стр.100.2.593

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Griffith, M., Lumb, C., Wiseman, S.B., Wisniewski, M., Johnson, R.W., и Marangoni, A.G. (2005). Белки-антифризы модифицируют процесс замораживания растений. Завод физиол. 138, 330–340. doi: 10.1104/стр.104.058628

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Го, С., Garnham, C.P., Whitney, JC, Graham, L.A., and Davies, P.L. (2012). Переоценка бактериального антифризного белка как адгезина с активностью связывания льда. ПЛОС ОДИН 7:e48805. doi: 10.1371/journal.pone.0048805

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Гупта, Р., и Десваль, Р. (2012). Анализ секретома, модулированного низкотемпературным стрессом, и очистка антифризного белка из Hippophae rhamnoides , гималайского чудо-растения. Дж. Прот. Рез. 11, 2684–2696. дои: 10.1021/pr200944z

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Гупта Р. и Десваль Р. (2014a). Рефолдинг β-цепочечной хитиназы класса I Hippophae rhamnoides усиливает антифризную активность во время холодовой акклиматизации. ПЛОС ОДИН 9:e

      . doi: 10.1371/journal.pone.00

      Реферат PubMed | Полнотекстовая перекрестная ссылка

      Гупта Р. и Десваль Р. (2014b). Белки-антифризы позволяют растениям выживать в условиях замерзания. J. Biosci. 39, 931–944.

      Академия Google

      Густа Л.В. и Фаулер Д.Б. (1977). Факторы, влияющие на холодоустойчивость озимых зерновых. Кан. Дж. Растениевод. 57, 213–219. doi: 10.4141/cjps77-029

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Густа Л.В., Вишневский М., Несбитт Н.Т. и Густа М.Л. (2004). Влияние воды, сахаров и белков на характер зарождения и распространения льда в акклиматизированных и неакклиматизированных листьях канолы. Завод физиол. 135, 1642–1653. doi: 10.1104/стр.103.028308

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Гай, CL (1990). Холодовая акклиматизация и стрессоустойчивость: роль белкового обмена. Анну. Преподобный Завод Физиол. Завод Мол. биол. 41, 187–223. doi: 10.1146/annurev.pp.41.060190.001155

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Хайтауэр Р., Баден К., Пензес Э., Лунд П. и Дансмюр П. (1991).Экспрессия антифризных белков в трансгенных растениях. Завод Мол. биол. 17, 1013–1021. дои: 10.1007/BF00037141

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Hill, T.C.J., Moffett, B.F., DeMott, P.J., Georgakopoulos, D.G., Stump, W.L., and Franc, G.D. (2014). Измерение активных нуклеирующих бактерий на льду на растениях и в осадках с помощью количественной ПЦР. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 80, 1256–1267. doi: 10.1128/AEM.02967-13

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хинча, Д.К., Хеллвеге, Э.М., Хейер, А.Г., и Кроу, Дж.Х. (2000). Растительные фруктаны стабилизируют фосфатидилхолиновые липосомы во время лиофилизации. евро. Дж. Биохим. 267, 535–540. doi: 10.1046/j.1432-1327.2000.01028.x

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Хирано, С.С., и Аппер, К.Д. (1995). «Экология льдообразующих активных бактерий», в Biological Ice Nucleation and its Applications , eds RE Lee, GJ Warren и LV Gusta (St. Paul, MN: APS Press), 41–61.

      Академия Google

      Холмберг, Н., Фаррес, Дж., Бейли, Дж. Э., и Каллио, П. Т. (2001). Направленная экспрессия синтетического кодон-оптимизированного гена, кодирующего антифризный белок еловой листовертки, приводит к накоплению антифризной активности в апопластах трансгенного табака. Ген 275, 115–124. doi: 10.1016/S0378-1119(01)00635-7

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хон, В. К., Гриффит, М., Чонг, П., и Ян, Д.SC (1994). Экстракция и выделение белков-антифризов из листьев озимой ржи ( Secale злаковый L.). Завод физиол. 104, 971–980. doi: 10.1104/стр.104.3.971

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Hon, W., Griffith, M., Mlynarz, A., Kwok, Y.C., and Young, D.S.C. (1995). Белки-антифризы озимой ржи аналогичны белкам, связанным с патогенезом. Завод физиол. 109, 879–889. doi: 10.1104/стр.109.3.879

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Хуанг, Т.и Думан, Дж. Г. (2002). Клонирование и характеристика термического гистерезисного (антифризного) белка с ДНК-связывающей активностью из паслена зимнего горько-сладкого, Solanum dulcamara . Завод Мол. биол. 48, 339–350. дои: 10.1023/A:1014062714786

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хуанг Т., Никодимус Дж., Зарка Д.Г., Томасшоу М.Ф., Вишневки М. и Думан Дж. (2002). Экспрессия антифризного белка насекомого ( Dendroides canadensis ) в Arabidopsis thaliana приводит к снижению температуры замерзания растения. Завод Мол. биол. 50, 333–344. дои: 10.1023/A:1019875922535

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хьюз М. и Данн М. (1996). Молекулярная биология адаптации растений к низким температурам. Дж. Экспл. Бот. 47, 291–305. doi: 10.1093/jxb/47.3.291

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Ярзабек, М., Пукацкий, П.М., и Нук, К. (2009). Холодорегулирующие белки с мощной антифризной и криозащитной активностью у елей ( Picea spp.). Криобиология 58, 268–274. doi: 10.1016/j.cryobiol.2009.01.007

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Юнг В., Кэмпбелл Р. Л., Гвак Ю., Ким Дж. И., Дэвис П. Л. и Джин Э. (2016). Новый богатый цистеином связывающий лед белок, секретируемый антарктической микроводорослью Chloromonas sp. PLOS ONE 11:e0154056. doi: 10.1371/journal.pone.0154056

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кавахара, Х., Фуджи А., Иноуэ М., Китао С., Фукуока Дж. и Обата Х. (2009). Антифризная активность акклиматизированной к холоду японской редьки и очистка антифризного пептида. Криолет. 30, 119–131.

      Реферат PubMed | Академия Google

      Келлер, М., Рюегг, А., Вернер, С., и Бир, Х. Д. (2008). Активная каспаза-1 является регулятором секреции нетрадиционных белков. сотовый 132, 818–831. doi: 10.1016/j.cell.2007.12.040

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кенворд, К.Д., Брандл Дж., Макферсон Дж. и Дэвис П.Л. (1999). Накопление антифризного белка рыб II типа в трансгенном табаке не обеспечивает морозоустойчивости. Трансгенный рез. 8, 105–117. дои: 10.1023/A:1008886629825

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ханна, Х.К., и Даггард, Г.Е. (2006). Направленная экспрессия переработанного и оптимизированного по кодонам синтетического гена приводит к ингибированию рекристаллизации и уменьшению утечки электролитов у яровой пшеницы при отрицательных температурах. Plant Cell Rep. 25, 1336–1346. doi: 10.1007/s00299-006-0191-9

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Найт, К.А., Дриггерс, Э., и ДеВрис, А.Л. (1993). Адсорбция на льду рыб антифризных гликопептидов 7 и 8. Биофиз. Дж. 64, 252–259. doi: 10.1016/S0006-3495(93)81361-4

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Найт, К.А., и Думан, Дж.Г. (1986). Ингибирование рекристаллизации льда белками теплового гистерезиса насекомых: возможная криозащитная роль. Криобиология 23, 256–262. дои: 10.1016/0011-2240(86)

      -9

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Контогиоргос, В., Реганд, А., Яда, Р.Ю., и Гофф, Х.Д. (2007). Выделение и характеристика структурирующих лед белков из акклиматизированного к холоду экстракта озимой пшеницы для ингибирования рекристаллизации в замороженных продуктах. J. Food Biochem. 31, 139–160. doi: 10.1111/j.1745-4514.2007.00112.x

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Ковальчук И., Ковальчук О., Кальк В., Бойко В., Филовский Дж., Хайнлайн М. и соавт. (2003). Системный сигнал растений, индуцированный патогенами, запускает перестройки ДНК. Природа 423, 760–762. doi: 10.1038/nature01683

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Койпер М.Дж., Дэвис П.Л. и Уокер В.К. (2001). Теоретическая модель растительного антифриза из Lolium perenne . Биофиз. Дж. 81, 3560–3565. doi: 10.1016/S0006-3495(01)75986-3

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Лауэрсен, К.Дж., Браун А., Миддлтон А., Дэвис П.Л. и Уокер В.К. (2011). Экспрессия и характеристика антифризного белка из многолетней ржаной травы, Lolium perenne . Криобиология 62, 194–201. doi: 10.1016/j.cryobiol.2011.03.003

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Левитт, Дж. (1980). Реакция растений на стрессы окружающей среды: стрессы от охлаждения, замораживания и высоких температур , 2-е изд. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Academic Press.

      Академия Google

      Линдоу, Ю. Э. (1983). Роль нуклеации бактериального льда в поражении растений морозами. Анну. Преподобный Фитопат. 21, 363–384. doi: 10.1146/annurev.py.21.0

      .002051

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Lu, C.F., Jian, L.C., and Kuang, T.Y. (2000). Секреторные антифризные белки, продуцируемые в суспензионной культуре клеток Rhodiola algida var. tangutica во время холодовой акклиматизации. Прог. Биохим.Биофиз. 27, 555–559.

      Академия Google

      Махфузи, С., Лимин, А. Э., и Фаулер, Д. Б. (2001). Онтогенетическая регуляция устойчивости к низким температурам озимой пшеницы. Энн. Бот. 87, 751–757. doi: 10.1006/anbo.2001.1403

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Марселлос, Х.В., и Сингл, В.В. (1979). Переохлаждение и гетерогенное зародышеобразование замерзания в тканях нежных растений. Криобиология 16, 74–77. дои: 10.1016/0011-2240(79)

      -0

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Marentes, E., Griffith, M., Mlynarz, A., and Brush, R.E. (1993). Белки накапливаются в апопласте листьев озимой ржи при холодовой акклиматизации. Физиол. Растение. 87, 499–507. doi: 10.1111/j.1399-3054.1993.tb02499.x

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Макнил, С., Нуччио, М., и Хэнсон, А. (1999). Бетаины и родственные им осмопротекторы. Мишени для метаболической инженерии стрессоустойчивости. Завод физиол. 120, 945–949. doi: 10.1104/стр.120.4.945

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Мейер, К., Кейл, М., и Налдретт, М.Дж. (1999). Богатый лейцином повторяющийся белок моркови, проявляющий антифризную активность. ФЭБС Письмо. 447, 171–178. doi: 10.1016/S0014-5793(99)00280-X

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Миддлтон, А. Дж., Браун, А. М., Дэвис, П. Л., и Уокер, В. К. (2009).Идентификация льдо-связывающей поверхности растительного белка-антифриза. ФЭБС Письмо. 583, 815–819. doi: 10.1016/j.febslet.2009.01.035

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Миддлтон А.Дж., Маршалл С.Б., Фаучер Ф., Бар-Долев М., Браславский И., Кэмпбелл Р.Л. и др. (2012). Белок-антифриз из морозоустойчивой травы имеет бета-складку с нерегулярной структурой, связывающей лед. Дж. Мол. биол. 416, 713–724. дои: 10.1016/j.jmb.2012.01.032

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Миддлтон, А. Дж., Вандербельд, Б., Бредоу, М., Томалти, Х., Дэвис, П. Л., и Уокер, В. К. (2014). Выделение и характеристика связывающих лед белков высших растений. Методы Мол. биол. 1116, 255–277. дои: 10.1007/978-1-4939-0844-8_19

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Морияма М., Абэ Дж., Ёсида М., Цуруми Ю. и Накаяма С.(1995). Сезонные изменения в морозостойкости, влажности и сухом весе трех трав умеренного пояса. Луговая наука. 41, 21–25.

      Академия Google

      Нада, Х., и Фурукава, Ю. (2005). Анизотропия кинетики роста на границах между протонно-неупорядоченным гексагональным льдом и водой: исследование молекулярной динамики с использованием шестицентровой модели H 2 O. J. Cryst. Рост 283, 242–256. doi: 10.1016/j.jcrysgro.2005.05.057

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Накамура, Т., Исикава М., Накатани Х. и Ода А. (2008). Характеристика реагирующей на холод внеклеточной хитиназы в культурах клеток костра и ее связь с антифризной активностью. Завод физиол. 147, 391–401. doi: 10.1104/стр.106.081497

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Накаяма К., Окава К., Какидзаки Т. и Инаба Т. (2014). Оценка защитной активности белка Cor15am, родственного обилию позднего эмбриогенеза (LEA), при различных стрессах in vitro. Бионауч. Биотехнолог. Биохим. 72, 1642–1645. doi: 10.1271/bbb.80214

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Olijve, L.L.C., Meister, K., DeVries, A.L., Duman, J.G., Guo, S., Bakker, H.J., et al. (2016). Блокирование быстрого роста кристаллов льда за счет небазальной адсорбции белков-антифризов. Проц. Натл. акад. науч. США 113, 3740–3745. doi: 10.1073/pnas.1524109113

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Пирс, Р.С. и Эшворт, Е. Н. (1992). Форма клеток и локализация льда в листьях или перезимовавшая пшеница при морозном стрессе в полевых условиях. Планта 188, 324–331. дои: 10.1007/BF00192798

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Пихакаски-Маунсбах, К., Гриффит, М., Антикайнен, М., и Маунсбах, А.Б. (1996). Иммунозолотая локализация глюканазоподобного антифризного белка у акклиматизированной к холоду озимой ржи. Протоплазма 191, 115–125. дои: 10.1007/БФ01281809

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Pudney, P.D.A., Buckley, S.L., Sidebottom, C.M., Twigg, S.N., Sevilla, M.P., Holt, C.B., et al. (2003). Физико-химическая характеристика устойчивого к кипячению незамерзающего белка из многолетней травы ( Lolium perenne ). Арх. Биохим. Биофиз. 410, 238–245. doi: 10.1016/S0003-9861(02)00697-5

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Рамзи, Дж. А. (1964). Ректальный комплекс мучного червя Tenebrio molitor , L.(Coleoptera, Tenebrionidae). Филос. Транс. Р. Соц. Б биол. науч. 248, 279–314. doi: 10.1098/rstb.1964.0013

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Рэймонд, Дж. А., и Де Вриз, А. Л. (1977). Адсорбционное торможение как механизм морозоустойчивости полярных рыб. Проц. Натл. акад. науч. США 74, 2589–2593. doi: 10.1073/pnas.74.6.2589

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Рэймонд, Дж. А., Янек, М.G. и Fritsen, CH (2009). Новые связывающиеся со льдом белки психрофильной антарктической водоросли (Chlamydomonadaceae, Chlorophyceae). J. Phycol. 45, 130–136. doi: 10.1111/j.1529-8817.2008.00623.x

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Регенте, М., Пинедо, М., Элизальде, М., и де ла Каналь, Л. (2012). Апопластные экзосомоподобные везикалы: новый способ секреции белков у растений? Сигнал завода. Поведение 7, 544–546. doi: 10.4161/psb.19675

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Сакаи, А.и Ларчер, В. (1987). Выживание растений при заморозках: реакция и адаптация к стрессу от замораживания , Vol. 62. Берлин: Спрингер. дои: 10.1007/978-3-642-71745-1

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Sandve, S.R., Rudi, H., Asp, T., и Rognli, O.A. (2008). Отслеживание эволюции семейства генов, связанных с холодовым стрессом, у устойчивых к холоду трав. BMC Evol. биол. 8:245. дои: 10.1186/1471-2148-8-245

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Скоттер, А.Дж., Маршалл, С.Б., Грэм, Л.А., Гилберт, Дж.А., Гарнхэм, С.П., и Дэвис, П.Л. (2006). В основе гиперактивности белков-антифризов. Криобиология 53, 229–239. doi: 10.1016/j.cryobiol.2006.06.006

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Сайдботтом, К., Бакли, С., Пудени, П., Твигг, С., Джарман, К., Холт, К., и др. (2000). Фитохимия: термостабильный белок-антифриз из травы. Природа 406:256. дои: 10.1038/35018639

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Симпсон, Д.Дж., Смоллвуд М., Твигг С., Дусе С.Дж., Росс Дж. и Боулз Д.Дж. (2005). Очистка и характеристика антифризного белка из Forsythia suspensa (L.). Криобиология 51, 230–234. doi: 10.1016/j.cryobiol.2005.06.005

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Smallwood, M., Worrall, D., Byass, L., Elias, L., Ashford, D., Doucet, C.J., et al. (1999). Выделение и характеристика нового белка-антифриза из моркови ( Daucus carota ). Биохим. Дж. 348, 385–391. дои: 10.1042/bj3400385

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Sönnichsen, F.D., DeLuca, C.I., Davies, P.L., and Sykes, B.D. (1996). Уточненная структура раствора антифриза III типа: гидрофобные группы могут быть вовлечены в энергетику взаимодействия белок-лед. Структура 4, 1325–1337. doi: 10.1016/S0969-2126(96)00140-2

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Степонкус, П.Л. (1984). Роль плазматической мембраны в отморожении и холодовой акклиматизации. Анну. Преподобный Завод Физиол. Завод Мол. биол. 35, 543–584. doi: 10.1146/annurev.pp.35.060184.002551

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Steponkus, P.L., Uemura, M., Balsamo, R.A., Arvinte, T., and Lynch, D.V. (1988). Трансформация криоповедения протопластов ржи путем модификации липидного состава плазматической мембраны. Проц. Натл. акад. науч. США 85, 9026–9030.doi: 10.1073/pnas.85.23.9026

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Sticher, L., Hofsteenge, J., Milani, A., Neuhaus, J.M., and Meins, F. (1992). Вакуолярные хитиназы табака: новый класс гидроксипролинсодержащих белков. Наука 257, 655–657. doi: 10.1126/science.1496378

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Stressmann, M., Kitao, S., Griffith, M., Moresoli, C., Bravo, L.A., and Marangoni, A.G. (2004).Кальций взаимодействует с белками-антифризами и хитиназой озимой ржи, акклиматизированной к холоду. Завод физиол. 135, 364–376. doi: 10.1104/стр.103.038158

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Сан, Т., Дэвис, П.Л., и Уокер, В.К. (2015). Структурная основа ингибирования газогидратов альфа-спиральными белками-антифризами. Биофиз. Дж. 109, 1698–1705. doi: 10.1016/j.bpj.2015.08.041

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Сан, Т., Лин, Ф. Х., Кэмпбелл, Р. Л., Аллингем, Дж. С., и Дэвис, П. Л. (2014). Белок-антифриз образует внутреннюю сеть из более чем 400 полуклатратных вод. Наука 343, 795–798. doi: 10.1126/science.1247407

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Такахаши Д., Ли Б., Накаяма Т., Кавамура Ю. и Уэмура М. (2014). Протеомика дробовика растительной плазматической мембраны и микродоменных белков с использованием нано-ЖХ-МС/МС. Методы Мол. биол. 1072, 481–498. дои: 10.1007/978-1-62703-631-3_33

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Талхаммер, А., и Хинча, Д.К. (2013). «Функция и эволюция близкородственных белков COR/LEA (регулируемых холодом/позднего эмбриогенеза) в Arabidopsis thaliana », в Адаптация растений и микробов к холоду в меняющемся мире , под ред. Р. Имаи, М. Йошида и Н. Мацумото (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Springer). дои: 10.1007/978-1-4614-8253-6_8

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Талхаммер, А., Хинча, Д.К., и Зутер, Э. (2014). Измерение устойчивости к замерзанию: утечка электролита и анализ флуоресценции хлорофилла. Методы Мол. биол. 1166, 15–24. дои: 10.1007/978-1-4939-0844-8_3

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Thomashow, MF (1998). Роль холодочувствительных генов в морозоустойчивости растений. Завод физиол. 118, 1–8. doi: 10.1104/стр.118.1.1

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Томасшоу, М.Ф. (1999). АККЛИМАЦИЯ РАСТЕНИЙ К ХОЛОДУ: гены толерантности к холоду и регуляторные механизмы. Анну. Преподобный Завод Физиол. Завод Мол. биол. 50, 571–599. doi: 10.1146/annurev.arplant.50.1.571

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Томальти, Его Превосходительство (2016). Изучение нескольких нетрадиционных взаимодействий белков, связывающих лед. Кингстон, Онтарио: Королевский университет.

      Академия Google

      Томальти, Х. Э., и Уокер, В. К.(2014). Нарушение активности нуклеации бактериального льда антифризным белком травы. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 452, 636–641. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.08.138

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Tomczak, M.M., Huncha, D.K., Estrada, S.D., Wolkers, W.F., Crowe, L.M., Feeney, R.E., et al. (2002). Механизм стабилизации мембран при низких температурах белком-антифризом. Биофиз. Дж. 82, 874–881. дои: 10.1016/S0006-3495(02)75449-0

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Тремблей, К., Уэлле, Ф., Фурнье, Дж., Данилюк, Дж. и Сархан, Ф. (2005). Молекулярная характеристика и происхождение новых двухкомпонентных регулируемых холодом белков ингибирования рекристаллизации льдом из злаков. Физиол клеток растений. 46, 884–891. doi: 10.1093/pcp/pci093

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Тыщенко М.Г., Дусе Д., Дэвис П.Л. и Уокер В.К. (1997). Антифризный потенциал белка теплового гистерезиса листовертки еловой. Нац. Биотехнолог. 15, 887–890. дои: 10.1038/nbt0997-887

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Уэмура М. и Йошида С. (1984). Вовлечение изменений плазматической мембраны в холодовую акклиматизацию проростков озимой ржи ( Secale злак L. cv Puma) . Завод физиол. 75, 818–826. doi: 10.1104/стр.75.3.818

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Уокер, В.К., Зенг, Х., Оно, Х., Дарабоина, Н., Шарих, Х., Багерзаде, А., и другие. (2015). Белки-антифризы как ингибиторы газогидратов. Кан. Дж. Хим. 93, 839–849. doi: 10.1139/cjc-2014-0538

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Уоллис, Дж. Г., Ван, Х., и Герра, Д. Дж. (1997). Экспрессия синтетического белка-антифриза в картофеле снижает высвобождение утечки электролита при отрицательных температурах. Завод Мол. биол. 35, 323–330. дои: 10.1023/A:1005886210159

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Уолтерс, К.Р., Серианни, А.С., Войтурон, Ю., Сформо, Т., Барнс, Б.М., и Думан, Дж.Г. (2011). Ксиломаннановый гликолипидный антифриз, вызывающий тепловой гистерезис, связанный с устойчивостью к холоду, обнаружен в различных таксонах. Дж. Комп. Физиол. Б. 181, 631–640. doi: 10.1007/s00360-011-0552-8

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ван, С., Amornwittawat, N., Juwita, V., Duman, J.G., Pascal, T.A., Goddard, W.A., et al. (2009). Аргинин, ключевой остаток для повышения способности антифризного белка жука Dendroides canadensis . Биохимия 48, 9696–9703. дои: 10.1021/bi

    • 3p

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ван, В., Вэй, Л., и Ван, Г. (2003). Многоступенчатая очистка антифризного белка из Ammopiptanthus mongolicus хроматографическим и электрофоретическим методами. Ж. Хроматогр. науч. 41, 489–493. doi: 10.1093/chromsci/41.9.489

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ваннер, Л. А., и Юнттила, О. (1999). Устойчивость к холоду у арабидопсиса. Завод физиол. 120, 391–400. doi: 10.1104/стр.120.2.391

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Уоррен Г. и Коротто Л. (1989). Консенсусная последовательность белков нуклеации льда из Erwinia herbicola, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas syringae . Ген 85, 239–242. дои: 10.1016/0378-1119(89)

      -5

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Веллинг А., Мортис Т., Палва Э. Т. и Юнттила О. (2002). Независимая активация холодовой акклиматизации низкой температурой и коротким световым периодом у гибридной осины. Завод физиол. 129, 1633–1641. doi: 10.1104/стр.003814

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Уинфилд, М. О., Лу, К., Уилсон, И.Д., Когхилл, Дж. А., и Эдвардс, К. Дж. (2010). Реакция растений на холод: транскриптомный анализ пшеницы. Завод Биотехнолог. J. 8, 749–771. doi: 10.1111/j.1467-7652.2010.00536.x

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Вишневский, М., и Фуллер, М. (1999). «Зарождение льда и глубокое переохлаждение в растениях: новые идеи с использованием инфракрасной термографии», в книге Адаптированные к холоду организмы: экология, физиология, энзимология и молекулярная биология , под редакцией Р.Маргезин и Ф. Шиннер (Берлин: Springer-Verlag).

      Академия Google

      Вишневский, М., Густа, Л., и Нойнер, Г. (2014). Адаптивные механизмы защиты растений от замерзания: краткий обзор. Окружающая среда. Эксп. Бот. 99, 133–140. doi: 10.1016/j.envexpbot.2013.11.011

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Wisniewski, M., Lindow, S.E., and Ashworth, E.N. (1997). Наблюдения за образованием и распространением льда в растениях с помощью инфракрасной видеотермографии. Завод физиол. 113, 327–334. doi: 10.1104/стр.113.2.327

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Уорролл, Д., Элиас, Э., Эшфорд, Д., Смоллвуд, М., Сайдботтом, К., Лиллфорд, П., и др. (1998). Повторяющийся белок моркови, богатый лейцином, который ингибирует рекристаллизацию льда. Наука 282, 115–117. doi: 10.1126/наука.282.5386.115

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ву, З., Цинь, Л., и Уокер, В.К. (2009).Характеристика и рекомбинантная экспрессия дивергентного белка нуклеации льда из ‘ Pseudomonas syringae ’. Микробиология 155, 1164–1169. doi: 10.1099/мик.0.025114-0

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Yaish, M.W.F., Doxey, A.C., McConkey, B.B., Moffatt, B.A., and Griffith, M. (2006). Холодоактивные глюканазы озимой ржи со способностью связывать лед. Завод физиол. 141, 1459–1472. doi: 10.1104/стр.106.081935

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Йе, С., Moffat, B.A., Griffith, M., Xiong, F., Yang, D.S.C., Wiseman, S.E., et al. (2000). Гены хитиназы, реагирующие на холод, кодируют антифризные белки озимых злаков. Завод физиол. 124, 1251–1263. doi: 10.1104/стр.124.3.1251

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Йошида М., Абэ Дж., Морияма М., Симокава С. и Накамура Ю. (1997). Сезонные изменения физического состояния кроны воды связаны с морозоустойчивостью озимой пшеницы. Физиол. Растение. 99, 363–370. doi: 10.1111/j.1399-3054.1997.tb00548.x

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Ю, К.С., и Лу, Ч.Х. (2011). Идентификация белков-антифризов и их функциональных остатков с помощью машины опорных векторов и генетических алгоритмов на основе композиций n-пептидов. ПЛОС ОДИН 6:e20445. doi: 10.1371/journal.pone.0020445

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ю, С. О., Браун, А., Миддлтон, А.Дж., Томчак, М.М., Уокер, В.К., и Дэвис, П.Л. (2010). Активность ингибирования реструктуризации льда в белках-антифризах с отчетливыми различиями в термическом гистерезисе. Криобиология 61, 327–334. doi: 10.1016/j.cryobiol.2010.10.158

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ю, Х.М., и Гриффит, М. (2001). Антифризная активность озимой ржи увеличивается в ответ на холод и засуху, но не абсцизовой кислоты. Физиол. Растение. 112, 78–86. doi: 10.1034/j.1399-3054.2001.1120111.x

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Чжан, К., Фей, С.З., Арора, Р., и Ханнапель, Д.Дж. (2010). Белки райграса многолетнего, ингибирующие перекристаллизацию льда, повышают устойчивость к замерзанию. Планта 232, 155–164. doi: 10.1007/s00425-010-1163-4

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Чжан С., Фей С. З., Варнке С., Ли Л. и Ханнапель Д.(2009). Профилирование транскриптома райграса пастбищного во время холодной акклиматизации с использованием экспресс-анализа меток последовательностей. J. Физиол растений. 166, 1436–1445. doi: 10.1016/j.jplph.2009.03.001

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Чжан, Д. К., Ван, Х. Б., Лю, Б., Фэн, Д. Р., Хе, Ю. М., и Ван, Дж. Ф. (2006). Антифризный белок моркови не проявляет ингибирующей полигалактуроназы активности семейства PGIP. Акта Жене. Грех. 33, 1027–1036.doi: 10.1016/S0379-4172(06)60139-X

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Чжан, Дж. Х., Ван, Л. Дж., Пан, К. Х., Ван, Ю. З., Чжан, Дж. К., и Хуанг, В. Д. (2008). Накопление и субклеточная локализация белков теплового шока в молодых листьях винограда при перекрестной адаптации к температурному стрессу. Науч. Хорт. 117, 231–240. doi: 10.1016/j.scienta.2008.04.012

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Чжан, С. Х., Вэй, Ю. Л., Лю, Дж., Ю, Х.M., Yin, J.H., Pan, H.Y., et al. (2011). Апопластная хитиназа CpCHT1, выделенная из венчика вязолистной, проявляет как антифризную, так и противогрибковую активность. биол. Растение. 55, 141–148. doi: 10.1007/s10535-011-0019-5

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Zhu, B., Xiong, A.S., Peng, R.H., Xu, J., Jin, X.F., Meng, X.R., et al. (2010). Сверхэкспрессия ThpI из Choristoneura fumiferana повышает устойчивость к холоду у Arabidopsis . Мол. биол. 37, 961–966. doi: 10.1007/s11033-009-9759-0

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Zhuang X., Yang C., Fevolden S. и Cheng C.H. (2012). Белковые гены в повторяющейся последовательности — антифризные гликопротеины в геноме атлантической трески. BMC Genomics 12:293. дои: 10.1186/1471-2164-13-293

      Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Транслируйте веб-видео на ТВ в App Store

      Лучшее приложение для кастинга! Транслируйте любое онлайн-видео на свой телевизор.

      iWebTV™ работает с Chromecast + Roku + Apple TV (4-го поколения) + Fire TV, а также со смарт-телевизорами на базе Roku или Chromecast.

      *** Основные характеристики ***

      • Поддерживается разрешение HD (1080p и до 4K в зависимости от устройства)
      • Расширенный браузер, поддерживает несколько вкладок браузера, блокирует или скрывает всплывающие окна со спамом, поиск из строки URL, реклама блокировщик, история посещенных страниц и т. д.
      • Автоопределение субтитров + библиотека субтитров фильмов/телепередач
      • Поддержка прямых трансляций
      • Предварительный просмотр видео: до 72 снимков для мгновенного поиска любимых сцен.
      • Готов к перееданию: поставьте в очередь несколько видео и наслаждайтесь.
      • Установите собственную домашнюю страницу, добавьте в закладки веб-страницу или видео.
      • Полное управление воспроизведением из приложения или с экрана блокировки после выхода из приложения.
      • Режимы конфиденциальности: анонимный и частный

      Некоторые из вышеперечисленных функций требуют покупки в приложении

      iWebTV фактически воспроизводит видео на вашем медиаплеере, что обеспечивает гораздо более высокое качество изображения, чем приложения, отражающие ваш экран.

      Примечания

      * За исключением форматов видео, несовместимых с iOS (flash)
      ** Большинство видеосайтов должны работать нормально, однако, если у вас возникли проблемы с трансляцией с вашего любимого сайта, отправьте нам сообщение через меню приложения > отзыв.Мы добавляем поддержку видеосайтов каждый день, и наиболее часто запрашиваемые веб-сайты получают ускоренный приоритет.
      *** Телевизоры следующих производителей имеют один или несколько продуктов, совместимых с iWebTV: Sony, Sharp, Philips, TCL, Vestel, RCA, Vizio, Toshiba, Philips, Magnavox, Polaroid (ищите «Roku Smart TV», «Chromecast buit -in», «Google Cast Ready»)

      iWebTV™ является товарным знаком Swishly Inc.

      Условия:

      • Политика конфиденциальности: http://www.swishly.com/webtv/privacy-policy .html
      • Условия использования: http://www.swishly.com/webtv/terms-of-use.html

      iWebTV предлагает различные обновления, одно из которых предоставляется по подписке. Вам не понадобятся эти подписки, если вы не транслируете видео на устройство Chromecast. Однако в целях раскрытия информации ниже приводится описание:

      «Потоковая передача через прокси для Chromecast» 0,99 долл. США в месяц или 9,99 долл. США в год

      .